AAVベクターとsmall RNAを用いた神経疾患の遺伝子治療開発研究

利用 AAV 载体和小 RNA 进行神经系统疾病基因治疗开发研究

• 批准号: 18KK0465
• 负责人: 小島 華林
• 金额: $ 9.9万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Fund for the Promotion of Joint International Research (Fostering Joint International Research (A))
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019 至 2023
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18KK0465/
• 关键词: MECP2; AAV; microRNA; 発現調整; 遺伝子治療; AAVベクター; 小児神経; miRNA; 大脳皮質オルガノイド; micro RNA

AAVベクターを用いた遺伝性神経疾患に対する遺伝子治療法開発は世界的に進展しているが、全ての神経細胞への導入および発現量の調節ができない点が課題である。申請者らは小児神経難病AADC欠損症に対し、正常AADC遺伝子搭載AAV2型ベクターを被殻に注入する遺伝子治療を8名に施行し、全例で運動機能の改善を得た(Kojima, et al. Brain 2019)。本研究では、海外共同研究者が得意とするsmall RNA関連技術を用い、以下を実施する。1：AADC欠損症や他の小児神経疾患をモデルに、small RNA等を用い、AAVで導入した遺伝子の発現調節法の開発。2：小児中枢神経疾患におけるmicroRNAの病因への関与の解析と遺伝子治療による介入 研究。3.小児神経疾患の遺伝子変異と表現系の関連を分子病態学的に解析する。 国内外の共同研究者と連携し、多くの小児神経疾患へのAAVとmicroRNA等を用いた遺伝子治療法開発の端緒とする。miRNA302は胎児期の神経幹細胞の分化や神経管閉鎖に重要な役割を果たす事が報告されている。また、遺伝子の発現調整と疾患表現系の関連を解析し、遺伝子治療方開発につなげる。今年度は、小児神経疾患のRett重複症候群の患者iPS細胞を樹立し、大脳皮質オルガノイドを作成し、神経発達過程を解析した。またMECP2重複症候群およびRett症候群に対する発現調整可能な治療用AAVベクターを作成し、効果を培養細胞で解析中である。

尽管使用AAV载体的遗传神经系统疾病的基因治疗方法的发展正在全球范围内进展，但挑战是它不能引入所有神经元细胞中，并且不调节表达的量。申请人对八名患者进行了基因治疗，其中将正常的AADC型载体带有AAV2载体带有儿科神经病的载体，并将其注射到壳核中，从而改善所有患者的运动功能（Kojima等人，Brain，Brain 2019）。这项研究使用了与RNA相关的小型技术，外国合作者专门研究以下方面：1：使用AADC缺乏症和其他儿科神经系统疾病的AAV引入的基因表达的开发。 2：分析使用基因治疗的小儿中枢神经系统疾病和干预研究的参与。 3。基因突变与小儿神经系统疾病的表型之间关联的分子病理分析。与国内和国际合作者合作，这将是使用AAV和microRNA用于许多儿科神经疾病开发基因治疗方法的开始。据报道，miRNA302在胎儿阶段的神经干细胞和神经管闭合中起重要作用。此外，分析了基因表达调控与疾病表达系统之间的关系，从而导致基因治疗方法的发展。今年，我们建立了用于儿科神经病疾病的IPS细胞RETT重叠综合征，创建了皮质器官，并分析了神经发育过程。此外，已经制备了用于MECP2复制综合征和RETT综合征的可调节表达的治疗AAV载体，并且已经在培养细胞中分析了效果。

项目成果

芳香族Lアミノ酸脱炭酸酵素(AADC)欠損症診断のための乾燥血液濾紙によるスクリーニング検査法と血漿AADC酵素活性測定系の開発.

使用干血滤纸和血浆 AADC 酶活性测量系统开发筛查测试，用于诊断芳香族 L-氨基酸脱羧酶 (AADC) 缺乏症。

• 发表时间: 2021
• 期刊: 日本マススクリーニング学会誌
• 作者: 渡邉知佳;小島華林;黒川愛恵・他
• 通讯作者: 黒川愛恵・他

Gene therapy for aromatic L-amino acid decarboxylase deficiency in Japan improved the motor and mental function of patients with various phenotypes.

日本针对芳香族 L-氨基酸脱羧酶缺乏症的基因治疗改善了各种表型患者的运动和精神功能。

• 发表时间: 2022
• 作者: 小島 華林;宮内 彰彦;池田 尚広;黒川 愛恵;大貫 良幸;中嶋 剛;平井 真洋;村松 一洋;小坂 仁;村松 慎一;山形 崇倫;Karin Kojima
• 通讯作者: Karin Kojima

MiR-302 Regulates Glycolysis to Control Cell-Cycle during Neural Tube Closure.

• DOI: 10.3390/ijms21207534
• 发表时间: 2020-10-13
• 期刊: International journal of molecular sciences
• 影响因子: 5.6
• 作者: Keuls RA;Kojima K;Lozzi B;Steele JW;Chen Q;Gross SS;Finnell RH;Parchem RJ
• 通讯作者: Parchem RJ

AADC欠損症遺伝子治療の長期効果

AADC 缺陷基因治疗的长期影响

• 发表时间: 2022
• 作者: 小島 華林;宮内 彰彦;池田 尚広;黒川 愛恵;大貫 良幸;中嶋 剛;平井 真洋;村松 一洋;小坂 仁;村松 慎一;山形 崇倫
• 通讯作者: 山形 崇倫

【小児遺伝子疾患事典】代謝疾患 DDC(関連疾患:芳香族L-アミノ酸脱炭酸酵素<AADC>欠損症).

【儿科遗传病词典】代谢性疾病DDC（相关疾病：芳香族L-氨基酸脱羧酶<AADC>缺乏症）。

• 发表时间: 2021
• 期刊: 小児科診療
• 作者: Kojima Karin;Wada Takahito;Shimbo Hiroko;Ikeda Takahiro;Jimbo Eriko F.;Saitsu Hirotomo;Matsumoto Naomichi;Yamagata Takanori;小島華林
• 通讯作者: 小島華林