Neue IL-4-Signaltransduktionswege bei der Proliferation und Differenzierung von B-Zellen

白细胞介素-4（IL-4）与B细胞刺激因子-1（BSF-1）密切相关。IL-4对B-Zellen有多效性作用，对体液免疫有调节作用。IL-4韦尔登通过IL-4 R α-Kette和γ-Kette（γc）的I型IL-4受体复合物产生。在我们的研究中，我们发现了三种不需要适配器的分子（p62，E-Syt 2和JAB 1）来识别IL-4 R，这些不需要的分子可以识别STAT 6和IRS，IL-4的效应是非常明显的。Im Fokus des Projektes steht die Untersuchung molekularer Details des neuen IL-4R Signaloglobulsowie der Relevanz dieser neuen Signalwege für B-Zellfunktionen in vivo.我们通过表达和重组来了解ESyt 2蛋白质的结构、钙和脂质结合。Derzeit韦尔登unsere kürzlich generierten Klone embryonaler Stammzellen in Blastozysten injiziert，um konophür E-Syt2 defiziente Mäuse zu generieren. B-Zellen（mb 1-Cre x fox-Jab 1-flox Mäuse）中JAB 1的选择性缺失导致B-Zelldifferentizierung的一个完整的阻断，通过转基因Bcl 2可以部分补偿。因此，在B-Zellen中添加了含有Tat-Cre蛋白的JAB 1等位基因，我们可以在体外快速生产JAB 1，并在B-Zellen中检测JAB 1与IL-4信号的相关性。在我们新一代的p62-gendefizienten Mäusen中使用B-Zellfunktionen，这是韦尔登。因此，韦尔登通过B-Zell Analysen对我们新建立的转基因Mäusen进行了检测，检测了一种多基因IL-4 R，仅能识别新的信号分子。BZellproliferation and der Antikörper-vermittelten Abwehr bei den genannten genetisch modifizierten Mäusen nach Infektionen mit Leishmania major Protozoen or der Borrelia burgdorferi Bakterien soll die Rolle der neuen IL-4R Signalwege bei humoralen Immunantworten in vivo afklären.

Interleukin-4 (IL-4) wurde ursprünglich als B cell stimulatory factor 1 (BSF-1) beschrieben. IL-4 hat pleiotrope Effekte auf B-Zellen und moduliert dadurch humorale Immunantworten. Die Wirkungen von IL-4 werden durch den Typ I IL-4 Rezeptorkomplex aus IL-4Rα-Kette und der γ-Kette (γc) vermittelt. In Vorarbeiten konnten wir drei bislang unbekannte Adaptormoleküle (p62, E-Syt2 und JAB1) des IL-4R identifizieren, die unabhängig von den bislang bekannten Signalwegen über STAT6 und IRS, IL-4 Effekte vermitteln können. Im Fokus des Projektes steht die Untersuchung molekularer Details des neuen IL-4R Signalosoms sowie der Relevanz dieser neuen Signalwege für B-Zellfunktionen in vivo. Wir konnten in der laufenden Förderperiode durch Expression und Reinigung größerer Mengen rekombinanten ESyt2 Proteins dessen Struktur, Calcium- und Lipidbindung bestimmen. Derzeit werden unsere kürzlich generierten Klone embryonaler Stammzellen in Blastozysten injiziert, um konditional für E-Syt2 defiziente Mäuse zu generieren. Die selektive Depletion von JAB1 in B-Zellen (mb1-Cre x fox-Jab1-flox Mäuse) führte überraschenderweise zu einem kompletten Block der B-Zelldifferenzierung, der durch transgenes Bcl2 partiell kompensiert werden kann. Es ist deshalb vorgesehen, in B-Zellen mit gefloxten JAB1-Allelen mittels Tat-Cre Protein, welches wir in größeren Mengen funktionell aktiv produziert haben, JAB1 in vitro zu deletieren, um anschließend die Relevanz von JAB1 für IL-4 Signale in B-Zellen überprüfen zu können. Weiterhin sollen B-Zellfunktionen in den von uns neu generierten p62-gendefizienten Mäusen untersucht werden. Ergänzt werden diese Untersuchungen durch B-Zell Analysen in den von uns bereits ebenfalls neu etablierten transgenen Mäusen, die einen mutierten IL-4R exprimieren, der nur über das neu identifizierte Signalosom wirken kann. Die Untersuchung der BZellproliferation und der Antikörper-vermittelten Abwehr bei den genannten genetisch modifizierten Mäusen nach Infektionen mit Leishmania major Protozoen oder Borrelia burgdorferi Bakterien soll die Rolle der neuen IL-4R Signalwege bei humoralen Immunantworten in vivo aufklären.