Etablierung von Doxyzyklin-regulierbaren Mauslinien zur reversiblen Expression von Transgenen in B-lymphoiden Zellen

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Die Möglichkeit, ein Gen bezüglich Beginn, Dauer und Menge seiner Expression sowohl in der Zellkultur als auch im transgenen Organismus kontrollieren zu können, hat wesentlich zur Aufklärung von Proteinfunktionen in Zellphysiologie und -differenzierung, Entwicklung oder Pathogenese beigetragen. In transgenen Organismen werden hauptsächlich zwei heterologe Regulationssysteme eingesetzt, das Tet- und das Cre/lox-System. Das Cre/lox-System kontrolliert die Expression eines Zielgens durch DNA-Rekombinationsereignisse. Das Tet-System hingegen besteht aus einem Minimalpromotor und einem von Tetrazyklin-Derivaten gesteuerten Transaktivator, bildet also eine künstliche Transkriptionseinheit. Die reversible Bindung des Transaktivators an den Minimalpromotor erlaubt es, die Expression des nachgeschalteten Zielgens durch Zugabe und Entfernung des Effektors mehrfach an und wieder auszuschalten. Gleichzeitig kann durch die gegebene Menge an Effektor auch die gebildete Menge des Zielproteins verändert werden. Unser Ziel ist es, Regulationssysteme zu entwickeln, die die kontrollierte Expression von Zielgenen während aller Stadien der B-Zellentwicklung ermöglichen. Die Kombination dieser von uns zu etablierenden Komponenten des induzierbaren Regulationssystems soll dazu beitragen, ein Mausmodell zur Untersuchung des an der humoralen Immunantwort beteiligten Transkriptionsfaktors Bcl6 zu etablieren.