潰瘍性大腸炎・大腸がんモデルにおける残存細胞群の粘膜再生とがん化特性の解明

阐明溃疡性结肠炎/结直肠癌模型中残留细胞群的粘膜再生和癌特性

• 批准号: 22KJ1244
• 负责人: 小林 美央
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Tokyo University of Agriculture and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ1244/
• 关键词: 潰瘍性大腸炎; 粘膜再生; Unrestituted cells; 大腸炎関連がん; マウス; 大腸オルガノイド

令和4年度は ①大腸炎モデル(DSS)および大腸炎関連がんモデル(AOM/DSS)におけるUnrestituted cells (UCs) の大腸陰窩幹細胞および娘細胞特性の解析 ②DSSモデルおよびAOM/DSSモデルにおけるオルガノイド作製と解析 ③DSSモデルおよびAOM/DSSモデルにおけるトレーシング解析、に取り組んだ。実験①では、AOM/DSSモデルとDSSモデルにおけるUCsの細胞特性を比較解析した結果、AOM/DSS群のUCsはDSS群と同様にDLL1陽性細胞が主要構成細胞である一方で、SOX9とLGR5の発現強度には変化がみられ、DSSモデルでは少数であったActive-Intestinal stem cell (LGR5強陽性SOX9弱陽性)およびSlowly-cycling Secretory precursor (LGR5弱陽性SOX9弱陽性) が維持される傾向が強いことがわかった。UCsはヘテロな発現で定義される前駆細胞であることが示唆された。DSSモデルとAOM/DSSモデルにおけるUCsの細胞特性の違いは、異なる実験条件を設定することにより、UCsが粘膜再生とがん化の両側面をもつという仮説を検証可能であることを示している。実験②では大腸オルガノイドの作製に成功した。全群でLGR5、SOX9に陽性細胞がみられ、特にAOM/DSS群ではLGR5、γ-H2AX (DNA傷害指標)に強い陽性を示した。これらの結果は、in vitroでのUCsの細胞特性の再現に向けて大きな前進であるといえる。実験③では、潰瘍期にはBrdU標識UCsが観察されたが再生期では大勢が非標識UCsであった。この結果は、UCｓの由来が一連のものではない細胞集団であることを示唆しており、さらに詳細なトレーシング解析を実施することがUCsの動態解明につながると傍証を得ることができた。

In the fourth year of this year, we analyzed the characteristics of colonic vulva stem cells (UCs) in colitis (DSS) and colitis (AOM/DSS), and analyzed the operation of DSS and AOM/DSS. The results of comparative analysis of cell characteristics of UCs in AOM/DSS group and DSS group were as follows: DLL1 positive cells mainly composed of cells in one side, SOX9 positive cells and LGR5 positive cells in the other side, SOX9 positive cells and LGR5 positive cells in the other side. DSS Active-Intestinal stem cell (LGR5 strongly positive SOX 9 weakly positive) UCs are the first cells to appear. DSS and AOM/DSS are different from each other in terms of cell characteristics, and UCs are different from each other in terms of mucosal regeneration. 2. The operation of the machine was successful. The positive cells of LGR5 and SOX9 in the whole group were mainly positive, while those of AOM/DSS group were mainly positive for LGR5 and γ-H2AX (DNA damage index). The result is that the reproduction of UCs 'cell characteristics in vitro is moving forward. In the lake period, UCs are identified by BrdU. This result demonstrates that the origin of UCs is a cell group, and a detailed analysis of the structure can be implemented, which provides evidence that the dynamic explanation of UCs is difficult.

项目成果

潰瘍性大腸炎・大腸がんモデルにおける潰瘍下残存上皮細胞塊の腸陰窩幹細胞由来娘細胞の再生・がん化特性の病理学的解析

溃疡性结肠炎/结直肠癌模型溃疡下残留上皮细胞团肠隐窝干细胞来源子细胞再生及癌化特征的病理分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 高松巧;伊藤喜之;茂野稜;呉建甫;北浦健太朗;井上真紀;高松巧・茂野稜・伊藤喜之・井上真紀;小林美央，臼井達哉，渋谷淳，吉田敏則;小林美央，臼井達哉，渋谷淳，吉田敏則;小林美央，臼井達哉，渋谷淳，吉田敏則
• 通讯作者: 小林美央，臼井達哉，渋谷淳，吉田敏則

潰瘍性大腸炎マウスおよびオルガノイドモデルにおける直腸肛門部のLgr5およびSox9陽性扁平上皮の非定型再生

溃疡性结肠炎小鼠和类器官模型肛门直肠区 Lgr5 和 Sox9 阳性鳞状上皮的非典型再生

• 发表时间: 2022
• 作者: 高松巧;伊藤喜之;茂野稜;呉建甫;北浦健太朗;井上真紀;高松巧・茂野稜・伊藤喜之・井上真紀;小林美央，臼井達哉，渋谷淳，吉田敏則
• 通讯作者: 小林美央，臼井達哉，渋谷淳，吉田敏則

瘍性大腸炎・大腸がんモデルにおける潰瘍部残存上皮塊unrestituted cellsの腸陰窩幹細胞由来娘細胞マーカーの発現解析

溃疡性结肠炎/结直肠癌模型残余上皮团未修复细胞中肠隐窝干细胞来源的子细胞标志物表达分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 高松巧;伊藤喜之;茂野稜;呉建甫;北浦健太朗;井上真紀;高松巧・茂野稜・伊藤喜之・井上真紀;小林美央，臼井達哉，渋谷淳，吉田敏則;小林美央，臼井達哉，渋谷淳，吉田敏則
• 通讯作者: 小林美央，臼井達哉，渋谷淳，吉田敏則