Development of humanized sugar chain in silkworm targeting for production of next-generation medical glycoprotein

开发家蚕人源化糖链，用于生产下一代医用糖蛋白

• 批准号: 23658286
• 负责人: PARK Enoch Y.
• 金额: $ 2.41万
• 依托单位: Shizuoka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23658286/
• 关键词: バイオテクノロジー; 糖鎖; タンパク質; 昆虫; 遺伝子; Ｎ－アセチルグルコサミニダーゼ; ヒト型糖鎖型糖鎖; ヒト型糖鎖

In order to provide an ability to synthesize sugar chains close to the complex type of mammalian cells from high mannose type of silkworm, we tried to modify the sugar chain synthetic pathway of silkworm. The activity of targeting N-acetylglucosaminidase in both Bm 5 cell and silkworm was decreased to 60% compared to control by adopting RNA silencing technology. As a test molecule IgG was expressed, and analyzed sugar chains. The paucimannose sugar chain of IgG accounted for 70% to 80% of the total, which suggests that silencing effect of N-acetylglucosaminidase was not enough to modify sugar chain synthetic pathway of silkworm. These results indicate that N-acetylglucosaminiltransferase may need to modify mannose type to complex type in silkworm.

为了提供从高甘露糖型家蚕合成接近哺乳动物细胞的复杂类型的糖链的能力，我们尝试修饰家蚕的糖链合成途径。采用RNA沉默技术后，Bm 5细胞和家蚕的N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性均比对照降低了60%。表达作为测试分子的IgG，并分析糖链。IgG中的寡甘露糖链占总糖链的70%~ 80%，说明N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的沉默作用不足以改变家蚕的糖链合成途径。这些结果表明，N-乙酰氨基葡萄糖转移酶可能需要在家蚕中将甘露糖型修饰为复合型。

项目成果

第V編トランスジェニック動物・昆虫・その他 第2 章 カイコによるヒト型抗体の生産と糖鎖解析, バイオ医薬品製造の効率化と生産機材の開発.監修山口照英

第五部分 转基因动物、昆虫及其他 第2章 蚕生产人类抗体和聚糖分析、生物制药制造的效率和生产设备的开发。 监督：Teruhide Yamaguchi

• 发表时间: 2012
• 作者: 百嶋 崇;朴 龍洙
• 通讯作者: 朴 龍洙

カイコ幼虫でのヘアピン型dsRNA発現によるN-アセチルグルコサミニダーゼの発現制御

家蚕幼虫中发夹型 dsRNA 表达对 N-乙酰氨基葡萄糖苷酶表达的调控

• 作者: 菊田 孝太郎;兼松亜弓;加藤 竜也;近藤幸子;矢木 宏和;加藤晃一;朴 龍洙
• 通讯作者: 朴 龍洙

カイコ幼虫でのヘアピン型dsRNA 発現によるN-アセチルグルコサミニダーゼの発現制御

家蚕幼虫中发夹型 dsRNA 表达对 N-乙酰氨基葡萄糖苷酶表达的调控

• 发表时间: 2013
• 作者: 菊田 孝太郎;兼松亜弓;加藤 竜也;近藤幸子;矢木 宏和;加藤晃一;朴 龍洙
• 通讯作者: 朴 龍洙

Development of humanized sugar chain in silkworm by silencing N-acetylglucosaminidase gene using RNA interference technique

利用RNA干扰技术沉默N-乙酰氨基葡萄糖苷酶基因开发家蚕人源化糖链

• 发表时间: 2012
• 作者: Ayumi Kanematsu;Vipin Kumar Deo;Tatsuya Kato;Enoch Y. Park
• 通讯作者: Enoch Y. Park

カイコ細胞及び幼虫でのshRNA発現によるN-アセチルグルコサミニダーゼ遺伝子の発現制御

家蚕细胞和幼虫中shRNA表达对N-乙酰氨基葡萄糖苷酶基因表达的调控

• 发表时间: 2012
• 作者: 兼松亜弓;Deo Vipin Kumar;加藤竜也;朴 龍洙
• 通讯作者: 朴 龍洙