权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

「生物工場」実現に向けたニワトリ卵白における組換えタンパク質のヒト型糖鎖修飾

鸡蛋清重组蛋白的人型糖基化，实现“生物工厂”

基本信息

批准号：
22K19260
负责人：
大石勲
金额：
$ 4.16万
依托单位：
National Institute of Advanced Industrial Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-06-30 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

バイオ医薬品など組換えタンパク質の需要は拡大しているが、現在の培養細胞を用いた高コストの製造技術は改善する必要がある。我々は遺伝子組換えニワトリの卵白に様々な組換えタンパク質を低コストで生産する技術を開発したが、医薬品製造などへの応用を考えたときにN-結合型糖鎖修飾がヒト型と比較して不完全であること（具体的には末端のガラクトースならびにシアル酸が欠けていること）が解決すべき課題であった。この糖鎖修飾の違いは、ニワトリ卵管細胞に発現する糖転移酵素の特性により決定されているため、適切な糖転移酵素を卵管細胞に発現させることで、卵管細胞により生産された卵白中の組換えタンパク質に、ヒト型のN-結合型糖鎖修飾が実現することが期待される。本年度、卵管組織でβ-1,4-galactosyltransferase 1 (ガラクトース転移酵素)とβ-galactoside α-2,6-sialyltransferase 1 (シアル酸転移酵素)を発現するノックインニワトリを樹立した。卵管特異的に発現させることを企図し、オボムコイドの翻訳開始点に２A自己切断ペプチド配列を介して両糖転移酵素が発現するようデザインした。ゲノム編集技術による遺伝子ノックインにより企図したニワトリの樹立に成功し、卵白におけるタンパク質のガラクトースならびにシアル酸修飾の顕著な亢進が認められた。このニワトリを他の組換えタンパク質を卵白に発現するニワトリと交配することで、該タンパク質のN-結合型糖鎖修飾をヒト型に近づけることができると期待される。

There is a growing need for quality control in medical products, and there is a need to improve the manufacturing process for high-quality products used in cultured cells. We have developed a new technology for the production of N-linked glycans, which is based on the analysis of N-linked glycans modified by N-linked glycans. The characteristics of the glycosyltransferase produced in oocytes are determined by the presence of glycosyltransferase in oocytes, and the presence of N-linked glycosyltransferase in oocytes is expected. This year, β-1,4-galactosyltransferase 1 and β-galactoside α-2,6-sialyltransferase 1 were found in egg tube tissues. The oval-specific enzyme is produced at the beginning of the conversion process and at the beginning of the conversion process. In the process of editing technology, the author tries to improve the quality of the products by modifying the products. The N-binding glycan modification of the protein is expected to occur when the protein is replaced by another protein.