人工チラコイド膜再構成系イメージング解析

人工类囊体膜重建系统的影像分析

• 批准号: 26650105
• 负责人: 岩井 優和
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-26650105/
• 关键词: 集光アンテナタンパク質; プロテオリポゾーム; イメージング

本年度は、遺伝子改変した集光アンテナタンパク質を大腸菌タンパク質発現システムを用いて精製し、得られた精製タンパク質と色素を再構成することで人工的に集光アンテナタンパク質を創り出すことを目指した。陸上植物シロイヌナズナには集光アンテナタンパク質をコードする複数の遺伝子が存在しており、それら全ての遺伝子のリン酸化部位を改変することを行った。これまでに報告されているリン酸化修飾されるアミノ酸残基と報告はされていないがリン酸化修飾の可能性があるアミノ酸残基をそれぞれ恒常的にリン酸化、もしくは脱リン酸化するようにアミノ酸置換を行い、それらを個別に大腸菌タンパク質発現ベクターに組み込むことに成功した。次に、それぞれの大腸菌で発現した遺伝子改変型集光アンテナタンパク質のHisタグ精製を行い、目的の集光アンテナタンパク質を大量に得ることに成功した。そして、得られたタンパク質と各光合成関連色素（クロロフィルやカロテノイド）を混合し、in vitro再構成を行うための条件検討を行った。その結果、精製タンパク質と色素がうまく組み込む条件を見出し、それらをショ糖密度勾配超遠心法で精製することにも成功した。しかし、現段階では精製した集光アンテナタンパク質の機能的な性質についての解析が必要である。今後、これらの精製タンパク質とチラコイド膜の性質と同様の脂質を混合し、それらを融合することで集光アンテナプロテオリポゾームの形成、そして、その後のタンパク質イメージング解析へと繋げる必要がある。

This year, we will change the light collection system to collect light. This year, we will find that you can use the essence to get the pigment, and then make it into the artificial light collector. On the plant, there are several parts of the plant, such as the plant, the whole plant, the acidified part, the acidified part. This is due to the possibility of acidizing. The possibility of acidizing, the possibility of acidizing, the possibility of acidi For the second time, you can see that there is a change in the type of light collection, the collection of light, the collection of light. The pigments (pigments, pig The results, the results In order to analyze the necessary information, we need to collect the information on the performance of the machine. In the future, we need to know that the properties of the membrane are the same as those of the lipid mixture, the fusion of the lipids, the collection of light, the formation of the membrane, the formation of the membrane, the fusion of the lipids, the fusion of lipids, the fusion of lipids, and the formation of the membrane.