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脂溶性化合物シコニンの分泌・生産における脂質輸送タンパク質LTPの役割の解明

阐明脂质转运蛋白 LTP 在脂溶性化合物紫草素分泌和生产中的作用

基本信息

批准号：
21K14828
负责人：
市野琢爾
金额：
$ 3万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

薬用植物ムラサキは、根から脂溶性の赤色色素シコニンを生産・分泌することで、病原菌等からの防御に役立てていると考えられている。ムラサキの細胞では、シコニンは小胞体で生合成された後、細胞外で顆粒状の形態として蓄積されるが、その分泌や蓄積の仕組みに関しては殆ど分かっていない。我々はシコニン生産時に顕著な発現誘導を示す2つの脂質輸送タンパク質 (LTP) LeLTP1とLeLTP2を見出した。本研究では、ムラサキ由来のこれら2つのLTPの局在解析と生化学的解析を行い、LTPタンパク質の分子機能を明らかにするとともに、ムラサキにおいてシコニン生産への関与の有無を検証する。また、LTPと相互作用するタンパク質やLTPに発現制御される遺伝子の探索を行う。これらの実験を通して、LTPがシコニン生産・分泌にどのように関与しているのかを明らかにする。本年度は、LeLTP2遺伝子のクローニングと発現ベクターの構築を行い、ベンサミアナタバコを用いた局在解析に供した。その結果、LeLTP2は細胞内において網目状の構造と顆粒状の構造に分布することがわかった。並行して、遠心分画とイムノブロット解析を行い、LeLTP1-GFPが膜画分と可溶性画分の両方に分布するタンパク質であることを生化学的に突き止めた。さらに、LeLTP1遺伝子を標的としたヘアピンRNA発現コンストラクトを構築し、遺伝子導入毛状根の作出を試みた。

Use plants, roots, fat-soluble pigments, red pigments, raw materials, pathogens, etc., to defend against diseases such as plant, root, fat-soluble, red pigment and pathogens. After the cells and small cells were synthesized, the extracellular cells were grained, the cells were stored, and the cells were secreted. We need to send the message message (LTP) LeLTP1 LeLTP2 message when you are in need of help. The reason for this study is that the LTP Bureau is analyzing the analytical technology of biochemistry, the molecular mechanism of biochemical analysis, and the molecular mechanism of biochemistry. The interaction between LTP and hardware is related to each other. The LTP is now available to control the behavior of child exploration. Please tell me that there is a lot of information about the secretion of the drugs, such as LTP, and so on. This year, the LeLTP2 department is trying to find out that the government is analyzing the supply of information. The result of the experiment, the distribution of the LeLTP2 intra-cellular network network, the distribution of the particles, the distribution of the cells. At the same time, the distribution of membrane painting, soluble painting, biochemistry, biochemistry and biochemistry were analyzed. Make an attempt to get rid of the hairy roots by showing that the hairy roots are in the hairy roots. In this case, you can see that the LeLTP1 child is in the hairy root.