Search for natural products that control from melanin production to the degradation via autophagy

本研究はオートファジーを介してメラニンを制御する天然物の探索を行うことで、新たな作用機序をもつメラニン制御物質を見出し、メラニンが関与する色素異常症に対する新たな治療薬の創出および治療標的分子の発見に貢献することを目標としている。昨年度は、ケラチノサイトHaCaT細胞を用いて、130 種の生薬エキスによるLCⅢ-2およびp62の発現を確認した結果、ケイヒ、シコン、マオウ、ウズの4エキスがLCⅢ-2およびp62の発現を大きく変動させることを見出した。今年度は、これらの4エキスのうち、マオウに着目し、分離精製を実施し、ヘキサン、酢酸エチル、n-ブタノール、水にて順次分配し、それぞれの画分を得た。得られた画分について、LCⅢ-2およびp62の発現を確認した結果、n-ブタノールおよび水画分に活性を得た。現在さらに分離精製を進め、活性成分の探索を進めている。さらに、上記4エキス以外のメラニン制御物質の探索を実施した。その結果、クズ葉がマウスメラノーマB16-F1細胞のメラニン合成促進作用を示した。さらに、本エキスをヘキサン、酢酸エチル、n-ブタノール、水で順次分配し、メラニン合成誘導能、細胞内Tyr活性、チロシナーゼ、TRP-1、TRP-2のタンパク質発現への影響を比較したところ、ヘキサン画分が最も強い活性を示した。さらに、ヒト皮膚3次元モデルにおいて、クズ葉エキスおよびヘキサン画分は黒化を顕著に誘導した。以上のことから、クズ葉が強いメラニン誘導能を有することが示された。

本研究はオートファジーを介してメラニンを制御する天然物の探索を行うことで、新たな作用機序をもつメラニン制御物質を見出し、メラニンが関与する色素異常症に対する新たな治療薬の創出および治療標的分子の発見に貢献することを目標としている。昨年度は、ケラチノサイトHaCaT細胞を用いて、130 種の生薬エキスによるLCⅢ-2およびp62の発現を確認した結果、ケイヒ、シコン、マオウ、ウズの4エキスがLCⅢ-2およびp62の発現を大きく変動させることを見出した。今年度は、これらの4エキスのうち、マオウに着目し、分離精製を実施し、ヘキサン、酢酸エチル、n-ブタノール、水にて順次分配し、それぞれの画分を得た。得られた画分について、LCⅢ-2およびp62の発現を確認した結果、n-ブタノールおよび水画分に活性を得た。現在さらに分離精製を進め、活性成分の探索を進めている。さらに、上記4エキス以外のメラニン制御物質の探索を実施した。その結果、クズ葉がマウスメラノーマB16-F1細胞のメラニン合成促進作用を示した。さらに、本エキスをヘキサン、酢酸エチル、n-ブタノール、水で順次分配し、メラニン合成誘導能、細胞内Tyr活性、チロシナーゼ、TRP-1、TRP-2のタンパク質発現への影響を比較したところ、ヘキサン画分が最も強い活性を示した。さらに、ヒト皮膚3次元モデルにおいて、クズ葉エキスおよびヘキサン画分は黒化を顕著に誘導した。以上のことから、クズ葉が強いメラニン誘導能を有することが示された。