リン脂質排出トランスポーターの活性化による関連疾患治療とリン脂質排出機序の解明

通过激活磷脂外流转运蛋白治疗相关疾病并阐明磷脂外流机制

基本信息

批准号：
21K15355
负责人：
池田義人
金额：
$ 2.91万
依托单位：
Shiga University of Medical Science (2022)Kobe Pharmaceutical University (2021)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

界面活性作用を有する胆汁酸は、脂質などの腸管吸収に重要である一方、胆汁鬱滞による高濃度存在時、細胞膜の脂質二分子膜構造を破壊することで肝障害を惹起する。これまでに研究代表者は、ヒト胆汁中のさまざまな胆汁酸による肝細胞障害が、胆汁中の主要リン脂質であるホスファチジルコリン(PC)と胆汁酸との混合ミセル形成によって減弱することを報告している。すなわち、胆汁中へのPC排出を促進する薬物は、胆汁鬱滞時にみられる肝障害を軽減することが期待できる。胆汁中へのPC排出には、肝細胞の毛細胆管膜に局在するATP-binding cassette transporter B4 (ABCB4)が必要である。本研究では、胆汁鬱滞性肝障害モデルマウスに対するタウリン抱合型ヒオデオキシコール酸(THDC)、タウリン抱合型ウルソデオキシコール酸(TUDC)の投与が及ぼす影響について評価してきた。本年度は、コール酸含有食誘発胆汁鬱滞性肝障害に対してみられたTHDC、TUDCの血中肝障害マーカー(AST、ALT活性上昇)の抑制効果が、Abcb4遺伝子ヘテロ欠損マウスにおいて減弱することを明らかにした。また、THDC、TUDC投与24時間後における胆汁中胆汁酸の組成を評価した結果、THDC、TUDCそれぞれの増大はみられたが、ともにコール酸含有食の自由摂餌によってコール酸に置換されていることが示された。Abcb4遺伝子ホモ欠損マウスは通常食による飼育でもAST、ALTの活性が上昇することに加えて、毛細胆管の障害を示唆するALPの活性上昇もみられたが、TUDC投与はこれらを抑制する傾向がみられた。ABCB4のリン脂質排出機序解明を目的に作出したABCB4変異体発現細胞を用いた検討から、細胞外ループを構成するアミノ酸の特性が重要であることが示されつつあり、今後はその詳細を追求する予定である。

虽然具有表面活性剂特性的胆汁酸对于脂质和其他物质的肠道吸收很重要，而当由于胆汁淤积性停滞而高浓度时，它们通过破坏细胞膜的脂质双层结构而导致肝脏损伤。迄今为止，首席研究人员报告说，由胆汁中各种胆汁酸引起的肝细胞损伤因形成磷脂酰胆碱（PC）的混合胶束，胆汁中的主要磷脂和胆汁酸会减弱。换句话说，可以预期将PC排泄物促进PC排泄到胆汁中的药物会减少胆囊囊肿中看到的肝脏损害。对于胆汁中的PC排泄，需要将ATP结合的盒式转运蛋白B4（ABCB4）定位于肝细胞的胆汁毛膜。这项研究评估了牛磺酸偶联的透明质酸羟基胆酸（THDC）和牛磺酸偶联的ursoxyoxycholic（TUDC）在胆汁淤积性肝损伤模型中的影响。今年，我们发现，在具有异性缺陷型ABCB4基因的小鼠中，THDC和TUDC标记的血液肝损伤（AST，ALT活性增加）的抑制作用减弱了。此外，在施用THDC和TUDC后24小时评估胆汁酸酸的组成时，发现尽管观察到THDC和TUDC中的增加，但两者都通过免费喂食含胆酸酸的饮食来代替。除了在正常饮食上繁殖AST和ALT的活性增加外，具有同性ABCB4基因的小鼠还显示出ALP活性的增加，这表明对胆管的损害损害，但TUDC给药显示抑制这些。使用表达ABCB4突变体的细胞进行的检查，这些细胞的创建是为了阐明ABCB4的磷脂排泄机理，表明构成细胞外环的氨基酸的性质很重要，我们计划将来追求细节。