microRNAとスーパーエンハンサーに着目した悪性リンパ腫のPVT1の役割解明

悪性リンパ腫の中でも特に8番染色体長腕24バンド（8q24）染色体転座を有する悪性リンパ腫の予後は不良であり、治療に難渋することがある。そのため、8q24染色体転座を有する悪性リンパ腫の腫瘍化の機構を明らかにして、新たな治療薬開発につなげることは重要である。染色体転座点近傍には腫瘍発症に重要な遺伝子が存在する。8q24転座点近傍にはガン遺伝子MYCとその下流にPlasmacytoma variant translocation 1 (PVT1)が存在する。PVT1はlong intergenic non-coding RNA（lncRNA）である。本研究の目的は、①PVT1内のmicroRNA (miR)と②転座により形成されるスーパーエンハンサーによるPVT1への影響に着目して悪性リンパ腫発症におけるPVT1の役割を明らかにすることである。令和4年度はPVT1 5’発現抑制効果を十分に得るためにPVT1 5’領域を欠失させるCRISPRベクターを設計してPVT1 5’発現抑制下での腫瘍細胞増殖変化の検討を試みた。CRISPRベクターをレンチウイルスを用いて8q24転座を有する悪性リンパ腫細胞株への導入を試みている。また、PVT1の腫瘍化に関わる要因としてPVT1プロモーター領域の変異に関しても検討している。悪性リンパ腫症例の骨髄液またはリンパ節から抽出したDNAを用いてプロモーター配列の変異を検討している。

悪性リンパ腫の中でも特に8番染色体長腕24バンド（8q24）染色体転座を有する悪性リンパ腫の予後は不良であり、治療に難渋することがある。そのため、8q24染色体転座を有する悪性リンパ腫の腫瘍化の機構を明らかにして、新たな治療薬開発につなげることは重要である。染色体転座点近傍には腫瘍発症に重要な遺伝子が存在する。8q24転座点近傍にはガン遺伝子MYCとその下流にPlasmacytoma variant translocation 1 (PVT1)が存在する。PVT1はlong intergenic non-coding RNA（lncRNA）である。本研究の目的は、①PVT1内のmicroRNA (miR)と②転座により形成されるスーパーエンハンサーによるPVT1への影響に着目して悪性リンパ腫発症におけるPVT1の役割を明らかにすることである。令和4年度はPVT1 5’発現抑制効果を十分に得るためにPVT1 5’領域を欠失させるCRISPRベクターを設計してPVT1 5’発現抑制下での腫瘍細胞増殖変化の検討を試みた。CRISPRベクターをレンチウイルスを用いて8q24転座を有する悪性リンパ腫細胞株への導入を試みている。また、PVT1の腫瘍化に関わる要因としてPVT1プロモーター領域の変異に関しても検討している。悪性リンパ腫症例の骨髄液またはリンパ節から抽出したDNAを用いてプロモーター配列の変異を検討している。