低分子化合物による肝前駆細胞を用いた肝加齢性変化の改善、若返り治療

使用低分子量化合物的肝祖细胞改善肝脏年龄相关的变化和恢复活力治疗

• 批准号: 21K16383
• 负责人: 原 貴信
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16383/
• 关键词: CLiP; 高齢マウス; 70%肝切除; 肝再生改善; 肝前駆細胞; 高齢; 肝再生

これまで、C57BL/6 高齢マウス（90週齢以上）、若年マウス（20週齢以下）の70％肝切除モデルを用い、高齢群の肝再生能が若年群と比較して劣っていることを明らかにした。また、若年マウスより分離した成熟肝細胞よりChemically-induced Liver Progenitor（CLiP）を作成。70%肝切除を行った高齢マウスに投与したところ、若年群と同等の再生率となった。またCLiPを投与した高齢群の肝組織ではKi-67陽性細胞の面積率が非投与群と比較して有意に増加しており、高齢肝においてCLiP投与による肝再生能の改善効果が示唆された。本年度はCLiP投与による肝再生シグナルの変化をみるため、CLiP投与の有無でJAK１の発現をみたところ、CLiP投与群ではJAKの発現が有意に低かった。CLiP投与により肝細胞への分化が可能な前駆細胞の絶対数が増加することから、残肝細胞の増殖が不要となり、JAK発現が不要であった可能性が考えられた。次にCLiP投与群と非投与群の高齢マウスを1日目、7日目に犠牲死させ肝組織を採取。採取した肝組織中のアルブミン（ALB）とトリプトファンオキシゲナーゼ(TO)の発現をRT-qPCRにより解析した。ALBとTOはいずれも成熟肝細胞のマーカーであり、これらはCLiPs投与群にて有意に増加していた。すなわち、肝再生がCLiP投与群においてより活発であったことが明らかとなった。増加した成熟肝細胞の由来を確認するためGFPマウスより作成したCLiPを投与し、FACSにて解析を行った。投与後１週間で組織を回収し解析したところ、全体の14.8±2.７％にGFP陽性細胞を認めた。このうちA1AT陽性であるものは94.8±2.1％であり、投与したCLiPが成熟細胞に分化し、肝再生の促進に寄与していることが明らかとなった。

Patients with advanced liver disease, C57BL/6 patients (over 90 years old), patients with 70% hepatectomy (less than 20 years old), and patients with higher liver regeneration energy levels are better than those with high age group (P < 0.05). The mature liver cells were separated from mature liver cells and made of Chemically-induced Liver Progenitor (CLiP). 70% of the patients underwent hepatectomy, and the regeneration rate was the same as that of the age group. The positive rate of Ki-67 in liver tissue was significantly higher than that in the group (P < 0.05). The positive rate of Ki-67 cells in the liver tissue was significantly higher than that in the group (P < 0.05). The positive rate of Ki-67 cells in the liver tissue was significantly higher than that in the group (P < 0.05). The results show that the improvement of liver regeneration can be improved. This year's investment in CLiP and liver regeneration has led to significant changes in the number of patients, CLiP and the presence of non-JAK1, CLiP and cluster JAK. The possibility of differentiation between CLiP and liver cells may be affected by the number of cells, the number of cells, the colonization of remnant liver cells, and the possibility of JAK cell differentiation. The second time CLiP investment and the group investment were compared with the group investment, and the liver tissue samples were collected on the 1st and 7th day. In the liver tissue, you need to know that the RT-qPCR was detected in the liver tissue (ALB). The RT-qPCR was detected in the liver tissue (TO). ALB, TO, mature liver, mature liver and mature liver. The CLiP of liver regeneration and liver regeneration is related to the health of the population. The reason for adding mature liver cells is to make sure that GFP cells are made into CLiP cells and FACS cells are parsed. In the last 1 year, the total number of GFP positive cells was 14.8 ±2.7%. To induce A1AT, to induce differentiation of mature cells, to promote liver regeneration and to induce liver regeneration, to induce the differentiation of mature CLiP cells.