ケミカルダイレクトリプログラミングによる肺胞上皮細胞誘導法の開発

利用化学直接重编程开发肺泡上皮细胞诱导方法

基本信息

批准号：
21K16514
负责人：
土肥良一郎
金额：
$ 3万
依托单位：
Nagasaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目的は第一に、肺常在の線維芽細胞を肺胞上皮細胞へ誘導するケミカルダイレクトリプログラミング法を開発することである。第二に、脱細胞化によって得られた生理的な3次元の臓器特異的な空間的鋳型を用いて、生体内の複雑な肺構造内における線維芽細胞の上皮細胞への時空間的な誘導過程を捉えることである。将来的な低分子化合物による生体内肺再生治療の実現へ向けての基礎技術となることが期待される。令和三年度は、研究の第一段階としてリプログラミングの細胞源とするヒト肺組織由来線維芽細胞の選定を開始した。疾患肺において特異的な肺組織常在線維芽細胞を最終的なリプログラミングの標的とするため、疾患肺の手術検体より採取したヒト肺組織から外植片培養により初代細胞を単離し、細胞免疫染色によって初代培養細胞の表現型の探索している段階である。肺組織由来の線維芽細胞は肺全体の30-40％を構成するとされ、線維化に関与する筋線維芽細胞やサーファクタントに含まれる脂肪を供給する脂肪線維芽細胞など複数の表現型が存在するが、常在肺線維芽細胞については定義がまだ曖昧な部分が多く同じ表現型でも複数の同定法が報告されているため、慎重に行っている。令和四年度は、リプログラミング法の開発へ向けて2型肺胞上皮細胞のレポーターマウスの導入を開始した。同マウスから採取した線維芽細胞を用いることで、ダイレクトリプログラミングによって2型肺胞上皮細胞へ分化したことを明確に証明できるため重要となる。しかし、COVID19感染による研究活動制限や人的要因による研究中断期間（令和4年4月～令和5年3月）が生じた。令和五年度は、マウス細胞を用いてダイレクトリプログラミングに用いる低分子化合物を網羅的に探索していく予定である。

这项研究的目的是开发一种化学直接重编程方法，该方法将肺居民成纤维细胞引导到肺泡上皮细胞。其次，我们使用通过脱细胞获得的生理，三维，器官特异性的空间模板来捕获生物体中复杂肺结构内成纤维细胞上皮细胞的时空诱导过程。预计它将成为使用小分子化合物的体内肺再生治疗的未来发展的基本技术。在2021年，作为研究的第一步，我们开始选择源自人肺组织的成纤维细胞，这是重编程细胞的来源。为了靶向患病肺中特定的肺组织驻留成纤维细胞作为最终重编程靶标，将原代细胞从epplant植物培养中从患病肺手术标本中收集的人类肺组织中分离出来，并通过细胞免疫抑制细胞搜索原代培养细胞的表型。据说源自肺组织的纤维细胞占整个肺的30-40％，并且多种表型，例如与纤维化和脂肪成纤维细胞有关的肌纤维细胞和脂肪细胞所含有的脂肪，这些表面含有脂肪所包含的脂肪，但据报道，据报道，据报道，这种定义仍然有多种识别，以及这种居民纤维纤维纤维的识别，甚至是现实的现象，既有现象，也存在现象。仔细完成。在2022年，我们开始引入2型肺泡上皮细胞的报告小鼠，以准备开发重编程方法。使用从同一小鼠收集的成纤维细胞使其很重要，因为可以清楚地证明它们已通过直接编程将它们分化为2型肺泡上皮细胞。但是，由于人为因素引起的研究活动限制，由于Covid19感染（2022年4月至2023年3月）导致的研究停学了一段时间。在2020财年，我们计划全面探索用于使用小鼠细胞直接重编程的小分子化合物。