口腔扁平上皮癌のΔNp63βを介したEMTにおけるmiR-205の機能について

miR-205在ΔNp63β介导的口腔鳞状细胞癌EMT中的作用

基本信息

批准号：
21K16949
负责人：
橋口有真
金额：
$ 1.83万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16949/
关键词：
OSCC EMT miRNA miR-205 ZEB p63 cancer microRNA

项目摘要

癌の浸潤・転移には、上皮-間葉転換（EMT）が関与していることが明らかとなってきた。これまでにわれわれは、口腔扁平上皮癌（OSCC）細胞において、p53のホモログであるΔNp63のスプライシングバリアントであるΔNp63βが、EMTの誘導に関与していることを示し誌上報告を行っている。しかし、その詳細な分子機構は未だ不明であったが、その分子メカニズムの検索過程においてmiRNAが重要な役割を担うことを導き、OSCC細胞株において、ΔNp63を発現していない高転移株SQUU-B細胞に対して、ΔNp63βベクターを導入した強制発現株SQUU-BO細胞と、コントロールとして空ベクターを導入したSQUU-BC細胞の２つを用いてmiRNAマイクロアレイ解析を行い、ΔNp63を強制発現させた際に最も発現に変動を認めたmiR-205について着目した。miR-205がΔNp63βを介したEMTにどのように関与するのかOSCCにおける発現と機能を検討し、miR-205がZEB1およびZEB2の発現を直接的に調節することで、OSCC細胞の遊走能・浸潤能に影響を与えていることを明らかにした。さらに、ZEB1・2以外の標的遺伝子が関与したΔNp63βを介したEMTについても解析していくために、miR-205の相同する塩基配列からTargetScan（version7.2）というツールを用いることで、594の遺伝子を候補として挙げた。これまでにわれわれは、SQUU-BO細胞・SQUU-BC細胞の２つを用いたDNAマイクロアレイ解析も行っており、ΔNp63βの強制発現に伴って変動した遺伝子の中で、さきほどのmiR-205の標的となる候補遺伝子と合致するものをピックアップした。その結果、ZEB1・2以外にも、BMPERなど26の遺伝子がそれに該当した。

很明显，上皮 - 间质转变（EMT）参与癌症侵袭和转移。迄今为止，我们在杂志上报道说，ΔNP63β是p53的同源物的ΔNP63的剪接变体，参与了口服鳞状细胞癌（OSCC）细胞中EMT的诱导。但是，尽管详细的分子机制仍然不清楚，但我们已经确定miRNA在分子机制的搜索过程中起着重要作用，在OSCC细胞系中，使用两个高度转移性菌株Squu-b细胞进行了miRNA微阵列分析，使用两个高度转移性菌株Squu-b细胞，该细胞与未表达Δnp63的细胞及其引入Δnp63的Δnp633的ΔNP63的细胞，这些细胞与Δnp63介绍了Δnp6333。一个空载体作为对照，而miR-205则集中在ΔNP63表达ΔNP63时，表达的变化最大。我们研究了miR-205在OSCC中的表达和功能，以确定miR-205如何通过ΔNP63β参与EMT，并揭示了miR-205直接调节Zeb1和Zeb2的表达，从而影响OSCC细胞的迁移和入侵潜力。此外，为了分析涉及ZEB1和2以外的靶基因的ΔNP63β介导的EMT，使用MiR-205的同源基碱基序列中的工具（版本7.2）将594个基因列为候选者。迄今为止，我们还使用两个Squu-BO细胞和Squu-BC细胞进行了DNA微阵列分析，并挑选出随着ΔNP63β强迫表达波动的基因，这些基因与前面提到的候选基因相匹配，该基因针对miR-205。结果，除了Zeb1和2个，还包括26个基因，例如BMPER。