誘導型皮膚関連リンパ組織（iSALT）のアトピー性皮膚炎における役割の解明

阐明诱导皮肤相关淋巴组织 (iSALT) 在特应性皮炎中的作用

基本信息

批准号：
22K15010
负责人：
朝比奈良太
金额：
$ 2.91万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15010/
关键词：
誘導型皮膚関連リンパ組織アトピー性皮膚炎樹状細胞

项目摘要

腸管や肺などの外界と接する上皮組織では、リンパ組織様構造が局所に認められ、侵入した抗原に対する生体防御機構としての役割が知られている。皮膚においては、炎症下で形成される誘導型皮膚関連リンパ組織（iSALT）が発見され、そこで樹状細胞によりキラーT細胞が活性化されることが示された。しかしながら、ヘルパーT細胞に対するiSALTの役割は検討されていないほか、活性化ヘルパーT細胞が病態の主軸を成すアトピー性皮膚炎におけるiSALTの関与は明らかになっていない。本研究では、iSALT内でのへルパーT細胞の活性化機構を解明し、ヒトとイヌのアトピー性皮膚炎におけるiSALTの役割を明らかにすることを目指す。iSALT形成局所の免疫反応を解析するために光変換蛍光タンパク（KikGR）を用いて、１）KikGRを発現したオボアルブミン（OVA）特異的なヘルパーT細胞を移入した遅延型過敏症モデル、２）CD11c-YFP/KikGRマウスを用いた接触皮膚炎モデル、の２つの実験系を確立した。前者は、iSALT内の抗原特異的ヘルパーT細胞の解析、後者は樹状細胞を含むiSALT構成細胞の解析に用いることができ、いずれも共焦点レーザー顕微鏡によりiSALT選択的に蛍光標識してフローサイトメトリーで解析できることを確認済みである。これらの実験系を用いて、iSALT内のヘルパーT細胞は活性化およびTrmマーカーであるCD69の発現が高いこと、iSALTを構成する主な樹状細胞は古典的樹状細胞2型（cDC2）であることを特定した。今後は、iSALTを標識した皮膚を用いたRNAシークエンスを行い、網羅的な解析からiSALTの新たな免疫学的意義の解明を目指す。

淋巴组织样结构是在与外部世界接触的上皮组织中局部观察到的，例如肠道和肺部，它们作为针对入侵抗原的生物保护机制的作用是已知的。在皮肤中，发现了在炎症下形成的可诱导皮肤相关的淋巴组织（ISALT），在此发现表明杀手T细胞被树突状细胞激活。然而，尚未研究Isalt对辅助T细胞的作用，伊萨尔特在特应性皮炎中的参与尚未阐明活化的助手T细胞形成主要病理病理学。这项研究旨在阐明Isalt内辅助T细胞激活的机理，并阐明Isalt在人类和犬类特应性皮炎中的作用。使用光电转换的荧光蛋白（KIKGR）建立了两个实验系统，以分析局部形成的免疫反应：1）延迟的超敏反应模型，其中kikgr表达表达kikgr的卵形蛋白（OVA） - 特异性助手T细胞 - 特定的助手T细胞，以及2）与CD11C-yfp/Kikgr cd11c yfp/kikike一起转移了接触性暗示性的模型。前者可用于分析Isalt中的抗原特异性辅助T细胞，后者可用于分析包括树突状细胞在内的ISALT组成细胞，并且已经证实，这两种细胞都可以选择性地用Isalt选择性地标记为使用Comcocal Laser Microscope和通过流式细胞仪分析的Isalt。使用这些实验系统，我们确定了Isalt内的助手T细胞，其激活和TRM标记CD69的表达高，并且组成Isalt的主要树突状细胞是经典的树突状细胞类型2（CDC2）。将来，我们将使用Isalt标记的皮肤进行RNA测序，并旨在通过全面的分析来阐明Isalt的新免疫学意义。