抗ウイルス抑制因子APOBEC3のB型肝炎治療応用に向けた基盤研究

抗病毒抑制蛋白APOBEC3在乙型肝炎治疗中的应用基础研究

• 批准号: 22K15474
• 负责人: 中野 雄介
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15474/
• 关键词: HBV; APOBEC3; HBx; B型肝炎ウイルス（HBV）; HBV-X

B型肝炎ウイルス（HBV）持続感染者の治療には主に核酸アナログ製剤が使用されるが、服用を中止すると高確率でウイルスが複製を開始する。これはHBV感染肝細胞の核内に存在するHBV由来のcccDNA（covalently closed circular DNA)によるものと考えられている。これまでの研究から、シチジン脱アミノ化酵素であり抗ウイルス抑止因子としても知られるAPOBEC3（A3）が、HBVのゲノム上に変異を蓄積させることでその複製を抑制することや、感染肝細胞核内に存在するcccDNAにも変異を導入することが報告されている。しかし、HBV感染患者の体内においてA3とHBVがどのような相互関係にあるのかは、まだよくわかっていない。両者の関係が検証できれば、A3を活用したHBVやcccDNAの抑制法の基盤構築に貢献できる可能性がある。そこで本研究では、HBV感染患者の血清を用いA3とHBVの関係を検討することを目的とする。具体的には、HBVゲノム中におけるA3由来の変異蓄積の確認実験、さらにHBV由来のウイルスタンパク質HBxによるA3発現制御の確認実験を展開する。本年度は、HBV感染患者の体内でHBVがA3由来の変異蓄積を受けているかを検証する目的で、HBV患者から同定したHBVゲノム解析を主に行なった。具体的には、同一患者において異なる時期に採取した血清からHBV DNAを抽出した後、次世代シークエンスを用いたHBVゲノムの解読とゲノム比較解析を行なった。その結果、HBVゲノム中にA3由来の変異はほぼ蓄積していないことが推察された。これについては、引き続き解析を進め、結論を出す予定である。

Treatment of hepatitis B virus (HBV) persistently infected persons involves the use, discontinuation, and initiation of replication of the virus. The presence of cccDNA (covalently closed circular DNA) in the nucleus of HBV-infected hepatocytes may be related to HBV infection. This study was conducted to investigate the presence of anti-HBV inhibitors and their association with APOBEC3 (A3), HBV replication inhibition, and the presence of cccDNA in the nucleus of infected hepatocytes. The relationship between HBV and A3 in patients with HBV infection The relationship between HBV ccDNA and A3 gene was studied. The possibility of using A3 gene to construct HBV ccDNA gene inhibition matrix was discussed. The purpose of this study is to investigate the relationship between HBV A3 and HBV in serum from HBV infected patients. Specifically, the identification of the accumulation of A3 origin in the HBV genome and the identification of A3 occurrence control in the HBV genome were carried out. This year, the aim of this study was to identify the origin and accumulation of HBV A3 in HBV infected patients and to analyze the HBV infection status of HBV patients. Specific, the same patient in different periods of time to take serum, HBV DNA, after extraction, the next generation, the use of HBV DNA analysis and comparative analysis As a result, the origin of HBV A3 is different from that of other genes. This is the first time that I have ever seen such a person.