活性酸素と脱アミノ化酵素APOBEC3が誘発する遠隔作用変異の分子機構の解明

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(1) 遠隔作用変異に関与する APOBEC3 分子種の同定：ヒト U2OS 細胞における各 APOBEC3 分子種の発現を調べたところ、APOBEC3B の発現量が一番多かった。また、APOBEC3B は核に局在する分子種であるため、APOBEC3B を siRNA によりノックダウンした。その結果、遠隔作用変異頻度が大幅に減少した。したがって、APOBEC3 が遠隔作用変異誘発に寄与していること、U2OS 細胞においては APOBEC3B が主に関与していることを明らかにした。(2) OGG1 以外の DNA グリコシラーゼ（修復酵素）の役割の解明：NTH1 のノックダウンにより変異体頻度が上昇し、NEIL1 のノックダウンにより変異体頻度が減少する傾向が観察された。一方、NEIL2 と NEIL3 をノックダウンしても変異体頻度は同程度であった。(3) ニック生成による遠隔作用変異誘発：ニック（3’-末端は水酸基、5’-末端は水酸基またはリン酸基）を有する DNA が非常に高い頻度で遠隔作用変異を誘発することを明らかにした。