がん微小環境におけるDKK1/3-CKAP4シグナルの機能解明と新規治療法の開発

阐明DKK1/3-CKAP4信号在癌症微环境中的功能并开发新的治疗方法

• 批准号: 22K15511
• 负责人: 佐田 遼太
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15511/
• 关键词: DKK1; CKAP4; 膵がん; 肝がん; 腫瘍免疫; 腫瘍微小環境; Wntシグナル; がん微小環境

私共はWntシグナル制御因子である分泌蛋白DKK1の新規細胞膜受容体CKAP4を同定し、種々のがんにおいてDKK1-CKAP4シグナルによる細胞増殖機構を明らかにしてきた。難治性がんにおけるDKK1-CKAP4シグナルとがん微小環境との関連については世界中で解析が進んでいないが、近年、様々ながんの微小環境においてDKK1が免疫調節活性を示すことが報告されている。私は本研究において、DKK1-CKAP4シグナルと腫瘍免疫の関連に特に着目して解析を行っている。令和４年度はhydrodynamic tail vein injection（HTVi）法を用いてDKK1および活性型CTNNB1、MET遺伝子を正常免疫マウス肝臓に発現させ、多発肝がんを作製するモデルを確立した。核出した腫瘍を解析し、DKK1タンパクの発現と、マウス血液中への分泌を確認した。しかし対照腫瘍と比較してDKK1発現腫瘍で肝腫瘍のサイズや個数に有意な差を認めず、免疫組織染色による評価では腫瘍微小環境に浸潤するCD4/8陽性T細胞の数に有意な変化を認めなかった。そこで、複数のがんドライバー遺伝子の組み合わせ、及びネオアンチゲン遺伝子を同様にHTVi法で肝臓に導入するモデルを作製した。同モデルにおいて得られた多発肝がんは、導入した遺伝子をそれぞれ異なる割合で発現し、多彩な組織像を示すことを確認した。現在、同モデルにおいてDKK1-CKAP4シグナル依存性の表現型を解析中である。また私は令和4年度にドキシサイクリン誘導性にDKK1およびネオアンチゲンを発現するマウス膵がんオルガノイドを正常免疫マウスの同所に移植するマウス膵がんモデルを作製した。ネオアンチゲン発現によって抗腫瘍免疫応答を誘導することに成功しており、現在、DKK1発現単独による表現型を解析中である。

Private altogether は Wnt シ グ ナ ル suppression factor で あ る secretory protein DKK1 の new rules on the cell membrane by the capacity of body CKAP4 を with し, kind of 々 の が ん に お い て DKK1 - CKAP4 シ グ ナ ル に よ る cells raised colonization institutions を Ming ら か に し て き た. Refractory が ん に お け る DKK1 - CKAP4 シ グ ナ ル と が ん tiny environment と の masato even に つ い て は world で parsing が into ん で い な い が, in recent years, others 々 な が ん の tiny environment に お い て DKK1 を が immunomodulatory activity in す こ と が report さ れ て い る. Private は this study に お い て, DKK1 CKAP4 シ グ ナ ル と swollen sores immune の masato even に especially に mesh し an analytical line を っ て て い る. Make and 4 year は hydrodynamic tail vein injection method (HTVi) を with い て DKK1 お よ び activity type CTNNB1, MET but 伝 を normal immune マ ウ ス routine liver に 発 now さ せ, multiple 発 liver が ん を cropping す る モ デ ル を establish し た. Nuclear out し た swollen sores を analytical し, DKK1 タ ン パ ク の 発 と, マ ウ ス blood へ の secretion を confirm し た. し か し polices according to swollen sores と compare し て DKK1 発 now swollen sores で liver abscess were swollen の サ イ ズ に や number to poor な を recognize め ず, immunohistochemical staining に よ る review 価 で は swollen sores tiny environment に infiltrating す る CD4/8 positive T cell number の に intentionally な variations change を recognize め な か っ た. そ こ で, plural の が ん ド ラ イ バ ー posthumous son 伝 の group み close わ せ and び ネ オ ア ン チ ゲ ン posthumous son 伝 を with others に HTVi method で routine liver に import す る モ デ ル を cropping し た. With モ デ ル に お い て have ら れ た 発 liver more が ん は, import し た posthumous son 伝 を そ れ ぞ れ different な る cut close で 発 し now, colorful な organization like を す こ と を confirm し た. Now, the same as モデ にお にお て てDKK1-CKAP4シグナ <s:1> dependence <s:1> phenotype を analysis である. ま た private は make and 4 year に ド キ シ サ イ ク リ ン induced に DKK1 お よ び ネ オ ア ン チ ゲ ン を 発 now す る マ ウ ス Cui が ん オ ル ガ ノ イ ド を normal immune マ ウ ス の with に transplantation by す る マ ウ ス Cui が ん モ デ ル を cropping し た. ネ オ ア ン チ ゲ ン 発 now に よ っ て swollen sores immune 応 answer を inducing す る こ と に successful し て お り, now, DKK1 発 単 now alone に よ る phenotype を parsing で あ る.

项目成果

肺がんにおけるCKAP4を標的としたバイオマーカーと治療薬の開発

肺癌靶向CKAP4生物标志物和治疗药物的开发

肝細胞がんにおけるDKK1-CKAP4シグナル軸の活性化の臨床的意義と治療薬開発への応用

DKK1-CKAP4信号轴激活在肝细胞癌中的临床意义及其在治疗药物开发中的应用

The Dickkopf1 and FOXM1 positive feedback loop promotes tumor growth and associates with poor prognosis of pancreatic and esophageal cancer

Dickkopf1 和 FOXM1 正反馈环促进肿瘤生长并与胰腺癌和食管癌的不良预后相关

• 发表时间: 2022
• 作者: Kikuchi Akira;Matsumoto Shinji;Sada Ryota;佐田遼太
• 通讯作者: 佐田遼太