優れた抗腫瘍効果を発揮する再生T細胞療法実現のための新規T細胞分化系の開発

开发新型T细胞分化系统，实现具有优异抗肿瘤效果的再生T细胞疗法

• 批准号: 22K15580
• 负责人: 早稲田 真澄
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15580/
• 关键词: 免疫再生治療; キラーT細胞; 3次元培養; Notchシグナル; iPS由来間葉系細胞(iMSC); ヒトiPS細胞; T細胞分化; 3次元培養法; ヒト間葉系細胞

本研究の目的は、優れた抗腫瘍効果を発揮する再生T細胞療法を実現するために、がん細胞を殺傷する能力を有するキラーT細胞と抗腫瘍効果を高める役割を有するヘルパーT細胞を、ヒトiPS細胞から誘導できるT細胞分化系を開発することである。予備検討の段階では、iPS細胞から神経堤細胞(Neural Crest Cell, NCC)と呼ばれる中間細胞を作製した上でNotch受容体のリガンドを遺伝子導入し、導入後の細胞を更に分化させることでT細胞分化を支持するフィーダー細胞として間葉系細胞(iPS-derived Mesenchymal Stromal Cell, iMSC)を得ていた。しかし、当該方法では遺伝子導入後に毎回Notchリガンドの発現レベルを確認する必要があったため、Notchリガンドを導入したiPS細胞を用いることで省力化できるかどうかを検討した。その結果、Notchリガンドの発現量に依存して分化が遅れるものの、無事iPS細胞からiMSCを誘導できることが確認出来た。これによりNotchリガンド発現iPS細胞を一度樹立してしまえば、iMSC分化ロット毎にNotchリガンドの発現レベルを確認する必要なく、研究を実施できるようになった。このiMSCを用いてT細胞分化を実施したところ、培養3週間程度でαβ型T細胞受容体(T Cell Receptor, TCR)を発現するCD4/CD8両陽性細胞が分化し、8週間程度でαβ型TCRを発現するキラーT細胞を得る事ができた。これまでの分化法では、予めαβ型TCRを導入したiPS細胞を用いる必要があったため単一のTCR発現T細胞しか誘導できなかった。当該TCRの多様性を確かめる必要性はあるものの、本法により複数のTCRを発現するキラーT細胞集団が分化可能になれば、任意の抗原を認識するTCRの取得に応用できるかも知れないと考えている。

In this study, the purpose of this study was to improve the ability of T-cell differentiation by using the method of T-cell regeneration. In this study, the purpose of this study was to improve the ability of T-cell differentiation by the method of T-cell regeneration. The Neural Crest Cell (NCC) cell of the Neural Crest Cell (NCC) is used as the host cell of the Notch recipient. The cell differentiation supports the cell differentiation of the cell (iPS-derived Mesenchymal Stromal Cell, iMSC). After the method is loaded, please return to the Notch and confirm that it is necessary to send it to the iPS cell. Use the method to save effort and save effort. The results show that the Notch response is dependent on the number of errors, and that the iPS cell is responsible for the iMSC response and the data is confirmed. This is the first time that the iPS cells have been detected. The iPS cells have been detected, and the iMSC has been differentiated. The Notch cells have been identified as necessary, and the research has been carried out. Differential T cell differentiation was performed in iMSC cells, T Cell Receptor (TCR) of α β type T cells was cultured for 3 times, and α β type TCR for 8 years was used to detect the differentiation of α β T cells. The method of differentiation was introduced into the iPS cells of α β-TCR, and the T cells were detected by TCR. When the TCR makes sure that it is necessary to make sure that it is necessary to make sure that it is necessary, this method uses the complex number of TCR to show that there is a possibility of differentiation in the T cell set, and that any antigen may be known as TCR.