汗アレルギーにおける抗原感作経路と汗抗原感作における汗のアジュバント効果の解明

阐明汗液过敏的抗原致敏途径以及汗液在汗液抗原致敏中的辅助作用

基本信息

批准号：
22K16281
负责人：
石井香
金额：
$ 3万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

多くのアトピー性皮膚炎患者（AD）やコリン性蕁麻疹患者では汗抗原（MGL_1304）に対する特異的IgEが検出されており、またこれらの患者は真皮内タイトジャンションの不良により汗管から真皮内に汗が漏出することが報告されている。前年度に終了報告した研究（ヘアレスマウスを用いて汗をアジュバントとした皮膚免疫を行うと真皮感作で特異的抗体が増強される現象や汗刺激したケラチノサイトが特定のサイトカインの発現増強とERKのリン酸化を確認；科研費課題番号20K17319）からの続きで、汗のアジュバント効果をさらにin vitroで分子レベルのメカニズムの追求を行った。まず汗刺激したヒトケラチノサイト細胞株（HaCaT）のRNAを採取しRNAシークエンスで遺伝子の発現状況を網羅的に解析した。その中で炎症やバリア機能低下に関連する幾つかの遺伝子の発現増強を確認したので、さらにリアルタイムPCRで再現性を確認した。汗の中にはIL-1α、IL-1β、IL-31が含まれていることは既知の報告があるので、それらのサイトカインを用いてケラチノサイトを刺激したところ、汗刺激と同様な遺伝子発現増強が確認できた。また汗中の３つのサイトカインの阻害剤（IL-1RA, IL-31中和抗体）を用いたところ、汗刺激による遺伝子増強を抑制することも確認したので、汗中のこれらのサイトカインは炎症やバリア機能に関係するカスケードのトリガーになり得ることが示唆された。今後は同様の実験を、表皮繊維芽細胞を用いて行い、汗アジュバント効果の追求をすると共に、汗管バリアのタイトジャンクションに関与するClaudin3 KOマウスを用いた抗原感作実験で、アジュバントとしての汗および上記のサイトカインの効果を、抗体産生を指標に検討していく予定である。

在许多特应性皮炎（AD）和胆碱能荨麻疹的患者中，已经检测到汗水抗原的特异性IgE（MGL_1304），据报道，由于不良的内部紧密连接，汗管渗出从汗管进入白皮子。 Continuing from the previous year's study (skin immunization using hairless mice as adjuvant using sweat as adjuvant) that was reported in the previous year (the phenomenon in which specific antibodies are enhanced by dermis sensitization, and keratinocytes stimulated by sweat confirm the enhanced expression of specific cytokines and phosphorylation of ERK; Kagaku Grant Problem No. 20K17319) we further pursued the体外的分子级机制。首先，收集了来自汗水刺激的人角质形成细胞系（HACAT）的RNA，并使用RNA序列对基因表达状态进行了全面分析。在这项研究中，我们证实了与炎症和屏障功能相关的几种基因的表达增强，并进一步证实了实时PCR的可重复性。由于有已知的报道表明汗液中包含IL-1α，IL-1β和IL-31，因此使用这些细胞因子刺激角质形成细胞，证实基因表达与汗水刺激相似地增强。此外，使用汗液（IL-1RA和IL-31中和抗体）中三种细胞因子的抑制剂用于抑制汗液刺激引起的基因增强，这表明汗中的这些细胞因子可以触发与炎症和障碍功能有关的级联反应。将来，将使用表皮成纤维细胞进行类似的实验，以追求汗液佐剂的作用，并还将使用抗原敏化实验的指数使用抗原敏化实验进行研究，使用抗原敏感性实验，这些小鼠涉及使用抗体壁炉的紧密连接，使用抗体生产抗体生产。

项目成果

期刊论文数量（2）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

汗刺激によるヒト角化細胞応答の解析

人类角质形成细胞对汗液刺激的反应分析

DOI：
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
Tanaka Yuka;Ito Takamichi;Tanegashima Keiko;Tsuji Gaku;Nakahara Makiko;Nakahara Takeshi;二ッ谷剛，村竜輝，安澤数史，望月隆，清水晶，飯沼由嗣;石井　香
通讯作者：
石井　香