RANKLを介したTRAIL陽性肝内在性NK細胞脆弱化メカニズムの解明と制御

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WTマウス(10～16週齢)の肝臓内リンパ球とRANKLをin vitroで共培養を行い、肝臓内NK細胞のTRAIL発現を検討した。TRAIL発現はRANKLの濃度依存性に低下し、100ng/mlのRANKL濃度では、TRAIL発現の有意な低下を認めた。この結果より、RANKLがTRAIL陽性肝内在性NK細胞の抗腫瘍性活性を抑制しているしていることが示唆された。続いて、WTマウス、大動脈石灰化マウスモデル(ApoE KO マウス)を用いて、RANKLの受容体であるRANKの肝臓組織中での発現をRT-PCRにより定量化したところ、両郡間で有意な差は認めなかった。さらに、より大動脈石灰化がすすんでいる40週齢でのApoEKOマウス、及び同週齢のWTマウスの肝臓内NK細胞の活性化マーカー(TRAIL、CD６９)の発現を比較検討したところ、WTマウスでは加齢に伴いが活性化マーカーの発現が低下していた一方で、ApoEKOマウスでは加齢に伴い活性化マーカーの発現が亢進していた。次に、WTマウス、 ApoEKOマウスの肝臓内ＮＫ細胞を用いて、マイクロアレイ解析を行ったところ、WTマウスの肝臓内NK細胞では、ApoEKOマウスと比べ、CLEAR signaling pathwayが活性化していた。CLEAR signaling pathwayの活性化のより、膜タンパク遺伝子TNFRSF11(RANKL)やTNFRSF11A(RANK)の発現が増加することが知られている。すなわち、この結果より、ApoEKOマウスの肝臓内NK細胞では、WTマウスと比べ、RANKL‐RANKシグナル活性が低下している可能性が示唆された。このことから、ApoEKOマウスを用いた検討では、大動脈石灰化に伴いRANKL‐RANKシグナル活性が低下することにより、肝臓内NK細胞が活性化することが示唆された。