RANKLを介したTRAIL陽性肝内在性NK細胞脆弱化メカニズムの解明と制御

RANKL介导的TRAIL阳性肝NK细胞弱化机制的阐明和控制

• 批准号: 22K16534
• 负责人: 中野 亮介
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2026-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16534/
• 关键词: 肝内在性NK細胞; TRAIL; RANKL

WTマウス(10～16週齢)の肝臓内リンパ球とRANKLをin vitroで共培養を行い、肝臓内NK細胞のTRAIL発現を検討した。TRAIL発現はRANKLの濃度依存性に低下し、100ng/mlのRANKL濃度では、TRAIL発現の有意な低下を認めた。この結果より、RANKLがTRAIL陽性肝内在性NK細胞の抗腫瘍性活性を抑制しているしていることが示唆された。続いて、WTマウス、大動脈石灰化マウスモデル(ApoE KO マウス)を用いて、RANKLの受容体であるRANKの肝臓組織中での発現をRT-PCRにより定量化したところ、両郡間で有意な差は認めなかった。さらに、より大動脈石灰化がすすんでいる40週齢でのApoEKOマウス、及び同週齢のWTマウスの肝臓内NK細胞の活性化マーカー(TRAIL、CD６９)の発現を比較検討したところ、WTマウスでは加齢に伴いが活性化マーカーの発現が低下していた一方で、ApoEKOマウスでは加齢に伴い活性化マーカーの発現が亢進していた。次に、WTマウス、 ApoEKOマウスの肝臓内ＮＫ細胞を用いて、マイクロアレイ解析を行ったところ、WTマウスの肝臓内NK細胞では、ApoEKOマウスと比べ、CLEAR signaling pathwayが活性化していた。CLEAR signaling pathwayの活性化のより、膜タンパク遺伝子TNFRSF11(RANKL)やTNFRSF11A(RANK)の発現が増加することが知られている。すなわち、この結果より、ApoEKOマウスの肝臓内NK細胞では、WTマウスと比べ、RANKL‐RANKシグナル活性が低下している可能性が示唆された。このことから、ApoEKOマウスを用いた検討では、大動脈石灰化に伴いRANKL‐RANKシグナル活性が低下することにより、肝臓内NK細胞が活性化することが示唆された。

To investigate TRAIL expression of NK cells in WT (10~16 weeks) TRAIL expression was found to be concentration-dependent on RANKL, and was found to be intentionally low at RANKL concentrations of 100ng/ml. The results showed that RANKL inhibited the anti-tumor activity of TRAIL-positive intrahepatic NK cells. The expression in liver tissue of RANK was quantified by RT-PCR and quantified by RT-PCR. A comparative study of the activation of NK cells (TRAIL, CD69) in liver tissues at 40 weeks after arterial calcification was performed. The second, ApoEKO, NK cells in the liver are activated, ApoEKO, CLEAR signaling pathway is activated. The activation of CLEAR signaling pathway and the increase in the development of membrane protein TNFRSF11 (RANKL) and TNFRSF11A (RANK) are known. The results indicate that ApoEKO activity in liver NK cells may be reduced by WT, RANKL-RANK, and RANKL-RANK. ApoEKO activity in the liver is associated with decreased RANKL-RANK activity due to calcification of the aorta.