腹膜中皮細胞由来エクソソームの解析に基づく胃癌腹膜転移の新規治療法の開発

基于腹膜间皮细胞来源的外泌体分析，开发胃癌腹膜转移的新治疗方法

• 批准号: 22K16540
• 负责人: 杉本 敦史
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Osaka Metropolitan University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16540/
• 关键词: エクソソーム; スキルス胃癌; 中皮細胞

本研究の目的は「胃癌腹膜転移の進展における中皮細胞の分泌するエクソソームの役割を解明し、難治性である胃癌腹膜転移の新しい治療法の開発」であり、まず研究実施計画I.「中皮細胞が分泌するエクソソームの胃癌細胞の遊走浸潤へ及ぼす影響」の検討を行なった。研究実施計画I-①.「中皮細胞が分泌するエクソソームの採取」は胃癌患者の腹水より分離培養を行い、合計４株の中皮細胞株を樹立した。樹立した中皮細胞株の培養上清を採取し、超遠心法によりエクソソームの分離を行なった。回収したエクソソームはウエスタンブロットによりエクソソームマーカー (CD9, CD63, CD81)の発現を同定し、電子顕微鏡による観察により細胞外小胞を同定し、エクソソームの存在を確認した。蛍光色素のPKH26で標識した中皮細胞株由来のエクソソームを胃癌細胞株（スキルス型および分化型）に添加したところ、いずれの胃癌細胞の細胞質内にエクソソームの取り込みが確認できた。また 研究実施計画I-②.「胃癌細胞の遊走浸潤へ及ぼす影響」は回収した中皮細胞由来のエクソソームを胃癌細胞株へ添加し、遊走能はWound healing assay、浸潤能はMatrigel invasion assay により検討した。Wound healing assayでは、中皮細胞由来のエクソソームはスキルス胃癌細胞株の遊走能を有意に促進した。一方、分化型胃癌細胞株の遊走能には影響しなかった。またMatrigel invasion assayでは、中皮細胞由来のエクソソームはスキルス胃癌細胞株の浸潤能を有意に促進した。今後、サイトカインアレイにより中皮細胞由来のエクソソームに含まれるサイトカインを解析し、胃癌細胞の遊走浸潤を促進する分子の同定を行う予定である。

The purpose of this study is to "Progress of gastric cancer peritoneal metastasis, secretion of mesothelial cells, and new treatment of refractory gastric cancer peritoneal metastasis" "Therapeutic Development" and "Therapeutic Research and Implementation Project I" "The effects of secretion of mesothelial cells and migration and infiltration of gastric cancer cells" by "Therapeutic Treatment". Research Implementation Plan I-①. "Collection of secreted mesothelial cells" and isolation and culture of ascites from patients with gastric cancer. A total of four mesothelial cell lines were established. The culture supernatant of the mesothelial cell line was established and the supertelecentric separation method was used. Recycled したエクソソームはウエスタンブロットによりエクソソームマーカー (CD9, CD63, The appearance of CD81) has been determined, and the existence of extracellular vesicles has been confirmed using electron microscopy. The origin of the PKH26 logo of the mesothelial cell line is the gastric cancer cell line (スキルス type およびDifferentiation type) したところにずれのGastric cancer cell のcytoplasmic にエクソソームのtake り込みがconfirmation できた.また Research Implementation Project I-②. "The influence of migration and infiltration of gastric cancer cells" は Recovery of the origin of mesothelial cells のエクソソームを Gastric cancer cell lines へ Add し, migration ability は Wound healing assay, infiltration ability は Matrigel invasion assayにより検検した. Wound healing assay, mesothelial cell origin, migration ability of gastric cancer cell lines, and intentional promotion of mesothelial cells. On the one hand, the migration of differentiated gastric cancer cell lines can affect the development of gastric cancer. The Matrigel invasion assay is used for the purpose of promoting the invasion of gastric cancer cell lines. From now on, サイトカインアレイにより mesothelial cell origin のエクソソームにまれるサイトAnalyzing and infiltrating gastric cancer cells promotes the molecular movement of gastric cancer cells.

项目成果

Predictive value of the Naples prognostic score on postoperative outcomes in patients with rectal cancer

• DOI: 10.1007/s00423-023-02851-2
• 发表时间: 2023-03-01
• 期刊: LANGENBECKS ARCHIVES OF SURGERY
• 影响因子: 2.3
• 作者: Sugimoto，Atsushi;Fukuoka，Tatsunari;Maeda，Kiyoshi
• 通讯作者: Maeda，Kiyoshi

Hard Palate Metastasis from Rectal Adenocarcinoma

• DOI: 10.1007/s12328-022-01630-8
• 发表时间: 2022-04-16
• 期刊: CLINICAL JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY
• 影响因子: 1
• 作者: Sugimoto, Atsushi;Hiramatsu, Soichiro;Aomatsu, Keiho
• 通讯作者: Aomatsu, Keiho