関節リウマチの骨破壊における12-HETEの機能

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関節リウマチ (RA)は、全身の関節炎をきたし、骨や軟骨が破壊され、関節機能が損なわれる炎症性疾患である。また多くの脂質メディエーターは炎症を惹起するが、近年、抗炎症作用を有する脂質メディエーターが知られている。リピドミクスを用いてRA患者とOA患者の関節滑液の脂質メディエーターを網羅的に比較解析したところ、炎症性のものに加え、抗炎症作用を有する脂質メディエーターの濃度も、RA患者で有意に高値であった。また、ROC曲線から、12-HETEは、RAとOAを区別する最も優れたバイオマーカーになる可能性が示されたが、RAにおける役割は不明である。本研究ではRAにおける12-HETEの機能を解析することを目的とした。本年度ではまず、① RA滑膜線維芽細胞における12-HETEの受容体であるGPR31およびBLT2の発現解析を行なった。人工膝関節全置換術(TKA)の際に採取したOA、RA関節滑膜の凍結切片を作製した。OA、RA滑膜でのGPR31およびBLT2の発現を解析した。結果、GPR31、BLT2ともにRAでOAと比較し有意に高値であった。次に、② 12-HETEがRA滑膜線維芽細胞の活性化を惹起するかを検証した。RA滑膜から滑膜線維芽細胞を単離・培養した。培養した滑膜線維芽細胞に、12-HETEを0、10、30、100 nMを添加後、0、6、12、24時間刺激し、その活性化をELISAで評価した。刺激濃度、時間では、有意差は認められなかった。そこで、滑膜線維芽細胞の発現ではなく、破骨細胞を評価することにした。③採取したRA滑膜から破骨細胞を分化培養し12-HETEで刺激した。生理食塩水で刺激するものと比較し、NFATc1 mRNAの発現は時系列を追っても、48時間まで高発現であった。