骨巨細胞腫における腫瘍細胞と免疫細胞の相互作用を対象とした新規薬物療法の開発

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本研究の目的は局所破壊性を有し、高い再発率と稀に肺転移や悪性転化を示す良悪性中間型の骨腫瘍である骨巨細胞腫の腫瘍周囲環境を検討し、新規薬物療法の可能性を探索することである。そこで、まず骨巨細胞腫の病理を確認するため、組織切片の染色を行った。骨巨細胞腫は破骨細胞様の多核巨細胞と腫瘍細胞と思われる紡錘形の細胞で構成された。更に免疫染色を行って腫瘍微小環境としてのマクロファージ等を探索した。また骨巨細胞腫手術検体より、コラゲナーゼとデオキシリボヌクレアーゼ、ヒアルロニダーゼを用いて細胞解離を行って、腫瘍細胞を単離し、細胞培養を試みた。腫瘍細胞は単離可能で、十分な増殖能があることを確認した。更に腫瘍細胞の特徴を検討するために。RNA抽出を行い、幹細胞マーカーやがん抑制遺伝子などの発現を質的リアルタイムPCR法で検討した。幹細胞の特徴としてはがん抑制遺伝子などの目立った増幅は認められなかった。　治療薬としての候補としてmTOR阻害薬を投与し、細胞増殖をスクラッチアッセイやMTTアッセイなどで確認したが、有意な幹細胞の増殖抑制効果は得られなかった。今年度の実験において検体数が少ないことは課題であるものの組織評価、in vitroでの細胞単離・培養、また阻害薬等投与による腫瘍細胞などの抑制効果などを確認する実験手法は確立されたと考えられ、今後はより詳細な構成細胞の性質・腫瘍美食環境について検討を行っていく予定である。