膀胱癌同種移植マウスモデルを用いた化学療法感受性を規定する腫瘍免疫微小環境の解明

使用膀胱癌同种异体移植小鼠模型阐明决定化疗敏感性的肿瘤免疫微环境

• 批准号: 22K16817
• 负责人: 北 悠希
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16817/
• 关键词: 膀胱癌; 腫瘍微小環境; 癌関連線維芽細胞; マウスモデル; 腫瘍免疫

本研究の目的は、膀胱癌の化学療法抵抗性に影響を与える腫瘍微小環境、特に癌関連線維芽細胞（CAF）の機能の解明である。今年度は、2つのマウス膀胱癌モデル(①UPPL; Upk3a-CreERT2; Trp53 flox/flox; Pten flox/flox、②BBN化学発癌モデル)由来の13種の新規膀胱癌細胞株を用い、野生型B6マウスに皮下移植を行うパイロット実験を行った。結果、正常免疫を有する野生型B6マウスに高率に皮下移植可能で、投薬実験の施行が可能と考えられる6細胞株を同定した。HE染色では、これらの膀胱癌細胞株は、同じモデル由来であっても全く異なる病理像を呈することが分かった。免疫染色では、BBN化学発癌モデル由来の細胞株から形成された皮下腫瘍では、腫瘍細胞周囲にαSMAやVimentin陽性の間葉系細胞、CD8陽性T細胞が豊富であることが見出された。すなわち、これら細胞株の同系皮下移植腫瘍間では、異なる腫瘍微小環境を呈するものと考えられた。次に、これら細胞株の同系皮下移植腫瘍間の腫瘍微小環境違いが化学療法感受性に与える影響を検証するために、in vitroにおけるシスプラチンの感受性と同系皮下移植腫瘍でのシスプラチンの反応性を定量化することとした。まず、in　vitroでは、これら細胞株間で、シスプラチンのIC50は同等であり、同様にシスプラチンの感受性を有することが分かった。同系皮下移植腫瘍においては、vehicle群と比較したシスプラチン群の増殖抑制効果がそれぞれの細胞株間で異なることが予想されるが、現在1種類の細胞株の投薬実験が終了した段階で、今後その他5種類の細胞株を用いて投薬実験を進めていく予定である。

The aim of this study was to elucidate the role of carcinoma-associated microenvironment (CAF) in bladder cancer chemotherapy resistance. This year, 13 new bladder cancer cell lines (①UPPL; Upk3a-CreERT 2; Trp53 flox/flox; Pten flox/flox; ②BBN chemical carcinogenesis) were developed for subcutaneous transplantation. The results showed that the wild-type B6 cells with normal immunity had a high rate of subcutaneous transplantation, and the 6 cell lines were identical in the study. HE staining of bladder cancer cell lines shows the same origin as that of normal bladder cancer cells. Immunostaining was used to detect αSMA and Vimentin positive mesenchymal cells and CD8 positive T cells in subcutaneous tumors. A study on the microenvironment of syngeneic subcutaneous transplantation of cell lines The sensitivity of allogeneic subcutaneous tumors to chemotherapy was quantified in vitro. The IC50 of cell lines is identical to that of cell lines in vitro, and the sensitivity of cell lines is similar to that of cell lines in vitro. The growth inhibition effect of syngeneic subcutaneous transplantation tumor is different between cell lines. The present cell line of 1 type is used in the final stage. The future cell line of another 5 types is used in the final stage.

项目成果

膀胱癌同種移植モデルを用いた化学療法感受性を規定する腫瘍微小環境の解明

使用膀胱癌同种异体移植模型阐明决定化疗敏感性的肿瘤微环境

• 发表时间: 2023
• 作者: Issei Kawakami;Hirofumi Yoshino;Wataru Fukumoto;Motoki Tamai;Shunsuke Okamura;Yoichi Osako;Takashi Sakaguchi;Satoru Inoguchi;Ryosuke Matsushita;Yasutoshi Yamada;Shuichi Tatarano;Masayuki Nakagawa;Hideki Enokida.;北悠希
• 通讯作者: 北悠希