Establishment of Patient-Derived Organoids and Drug Screening for Cervical Cancer

患者源性类器官的建立和宫颈癌药物筛选

• 批准号: 22K16826
• 负责人: 朝野 拓史
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16826/
• 关键词: 子宮頸癌; 患者由来オルガノイド; 薬剤スクリーニング; オルガノイド; 新規薬物治療

本研究では、子宮頸癌患者由来オルガノイド（Cx-PDO）の樹立方法を確立し、患者腫瘍との相同性の確認、Cx-PDOを用いた薬剤スクリーニングと臨床予後との相関の検証、新規治療方法の開発を目標とした。本年度はまず樹立方法の確立、患者腫瘍との確認、薬剤スクリーニング方法の確立を行った。13例の子宮頸癌患者より文書により同意を取得し、生検検体又は手術検体の一部を細断し、酵素処理で単離した細胞をMatrigelに包埋した。無血清培地に各種の増殖因子を添加し、5% CO2インキュベーターにて37 ℃で培養した。対象とした13例から合計15検体でCxPDOの樹立を試みた。15検体中11検体（73％）でCxPDOが樹立された。当初使用していた増殖因子の組成を変更することで、特に扁平上皮癌（SCC）におけるオルガノイド形成速度が35倍に改善し、手術材料だけではなく生検検体からの樹立も可能となった。特に、2例では生検検体と手術材料からCx-PDOを樹立可能だった。組織型では非扁平上皮癌（non-SCC）4例中3例、扁平上皮癌（SCC）11例中8例で樹立され、いずれも患者腫瘍の形態的特徴を模倣していた。また、正常上皮からのPDO樹立を試み、4例中3例で樹立に成功した。薬剤スクリーニングでは、SCCに比べnon-SCCではシスプラチンに対する感受性が低い傾向を認めた。Cx-PDOの樹立方法および薬剤スクリーニングを安定して行うことが可能となった。また、一部の検体から核酸を抽出しその品質が問題ないことを確認できた。

This study で は, cervical cancer patients with origin オ ル ガ ノ イ ド Cx - (PDO) の set up methods を し, swollen sores in patients with と の identity の confirmation, Cx - PDO を い た 薬 tonic ス ク リ ー ニ ン グ と after clinical to と の phase masato の 検 certificate, the new rules treatment の open 発 を target と し た. This year, the <s:1> まず establishment method <e:1> was established, the patient abscess と was confirmed, the drug ス <s:1> リ ニ ニ ニ グ グ method <s:1> was established, and the を った practice った was carried out. 13 cases の cervical cancer patients with よ り documents に よ り agrees to acquire を し, raw 検 検 body and は surgery 検 body の a を fine broken し, enzyme 処 で 単 from し た cells を Matrigel に embedding し た. Serum-free culture に various <s:1> growth factors を were added to <s:1>, 5% CO2 <s:1> キュベ キュベ タ タ にて にて were cultured at 37 ° c で, and <s:1> た were carried out. A total of 15検 bodies でCxPDO <s:1> establish を try みた. In 15検 bodies, 11検 bodies (73%) でCxPDOが establish された. When using し て い た rights of colonization factor の を - more す る こ と で, に squamous cell carcinoma (SCC) に お け る オ ル ガ ノ イ ド forming speed improvement of 35 times が に し, operation material だ け で は な く raw 検 検 body か ら の may establish も と な っ た. Special に, 2 cases of で で of 検検 body と surgical materials ら らCx-PDOを establish the possibility of だった. In 4 cases of histological で で non-squamous cell carcinoma (non-SCC), 3 cases, and in 11 cases of squamous cell carcinoma (SCC), 8 cases で established the characteristics of the tumor <s:1> morphology in され and ずれ ずれ ずれ patients を mimicked て て た た. Youdaoplaceholder0, normal epithelium ら <s:1> PDO establishment を attempt み, 3 out of 4 で establishment に successful た た. 薬 tonic ス ク リ ー ニ ン グ で は, SCC に than べ non - SCC で は シ ス プ ラ チ ン に す seaborne る sensitivity low が い tendency を recognize め た. Cx - PDO の set method お よ び 薬 tonic ス ク リ ー ニ ン グ を settle し て line う こ と が may と な っ た. ま た, a の 検 body か ら を nucleic acid extraction し そ の が quality problem な い こ と を confirm で き た.

项目成果

子宮頸部すりガラス細胞癌の分子免疫学的検討

宫颈磨玻璃细胞癌的分子免疫学研究

• 发表时间: 2022
• 作者: 朝野拓史;村上薫;長谷部理恵;石塚泰也; 畑中佳奈子;畑中豊;渡利英道;村上正晃
• 通讯作者: 村上正晃

患者体腔液がん細胞由来3次元オルガノイド培養を用いた薬剤スクリーニングの取り組み

使用源自患者体腔液癌细胞的 3D 类器官培养物进行药物筛选工作

• 发表时间: 2022
• 作者: 朝野拓史;畑中佳奈子;畑中豊;渡利英道
• 通讯作者: 渡利英道

子宮頸癌患者由来オルガノイドの樹立方法の検討

建立源自宫颈癌患者的类器官的方法的检查

• 发表时间: 2022
• 作者: 朝野拓史;石塚泰也;山崎博之;黒須博之;井平圭;遠藤大介;三田村卓;金野陽輔;加藤達矢;武田真人;工藤正尊;渡利英道
• 通讯作者: 渡利英道