Elucidation of the mechanism of tissue repair of macular hole and possibility of treatment using amniotic membrane

黄斑裂孔组织修复机制的阐明及羊膜治疗的可能性

• 批准号: 22K16957
• 负责人: 田中 寛
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16957/
• 关键词: 黄斑円孔; 羊膜

難治性黄斑円孔に対して他家移植である羊膜移植が注目されているが、未だ組織修復や視機能改善のメカニズムは明らかにはなっていない。本研究の目的は、in vitro実験において羊膜上と網膜細胞の遊走伸展との関係を明らかにし、家兎の黄斑円孔モデルを用いて生体内での羊膜の役割を明らかにすることである。ミュラー細胞の羊膜に対する接着能、遊走能の検討においては、in vitro実験において24wellプレートに羊膜を貼り付けた２群；上皮側を表にして貼り付けた群(上皮群)、絨毛膜側を表にして貼り付けた群（絨毛膜群）を作成し、中央に3mm径のシリコンを留置する（各n=5）。それぞれの群に0.5x105個のヒトミュラー細胞を播種し24時間後にシリコンを除去する。除去直後、また72時間後に位相差顕微鏡画像を撮影、免疫細胞染色（phalloidin）を行い、それらの画像より細胞形態を評価、また細胞移動面積を測定して細胞の遊走能を評価した。ミュラー細胞は羊膜の上皮側では仮足を伸ばし、縦横比が高い接着像が得られた一方で絨毛膜側では円形で縦横比が低い接着性を示す像が得られた。遊走実験においては、上皮側では絨毛膜側に対して有意に遊走能が高い(t検定; p<0.05)結果が得られた。次に、in vivoでの羊膜移植の有効性を確認するため、家兎の網膜円孔モデルを作成した後、コントロール（無治療群）と羊膜移植を行った群（羊膜群）において組織修復過程の差を画像解析にて確認した。修復後の組織を家兎の黄斑円孔モデルに対して羊膜を挿入し2mm径の円孔部に同径の羊膜を留置し、術後のOCT画像の取得に成功した。

Refractory macular hole has drifted back towards &yen; に し seaborne て his transplant で あ る amniotic membrane transplantation が attention さ れ て い る が, can't repair や だ organization function to improve の メ カ ニ ズ ム は Ming ら か に は な っ て い な い. は の purpose this study, in vitro be 験 に お い て amniotic membrane stretch と retinal cells の wander と の masato を and Ming ら か に し, home 兎 の macular hole has drifted back towards &yen; モ デ ル を with い て in raw で の amniotic membrane cut を の service Ming ら か に す る こ と で あ る. ミ ュ ラ ー cells の amniotic に す seaborne る could then, walk can の beg に 検 お い て は, the in vitro be 験 に お い て 24 well プ レ ー ト に amniotic を stick り pay け た 2 group; Epithelial side を table に し て stick り pay け た group (epithelial), chorion side を table に し て stick り pay け た group (chorion groups) を made し, central に 3 mm diameter の シ リ コ ン を lien す る (n = 5). The それぞれ それぞれ population に0.5x105 <s:1> ヒト ュラ ュラ <s:1> cells を were sown for <s:1> 24 hours and then にシリコ を を を were removed する. After removal of straight, ま た に a difference after 72 time 顕 micromirror portrait を pinch of shadow, immune cell staining (phalloidin) line を い, そ れ ら の portrait よ り cell morphology を review 価, ま た determination of cellular mobile area を し て cells の wander を review 価 し た. ミ ュ ラ ー cells は amniotic epithelial side の で は 仮 foot を stretch ば し, 縦 horizontal than high が い then like a が ら れ た side で chorionic side で は has drifted back towards &yen; form で 縦 cross is lower than が い then sex を shown す as ら が れ た. Walk be 験 に お い て は, epithelial side で は chorionic side に し seaborne て intentionally に can wander が high い (t 検; p < 0.05) results ら が れ た. に, the in vivo で の の amniotic membrane transplantation have sharper sex を confirm す る た め, home 兎 の retinal hole has drifted back towards &yen; モ デ ル を made し た, コ ン ト ロ ー ル と amniotic membrane transplantation group (no treatment) line を っ た group (amniotic membrane group) に お い て tissue repair process analytical に の poor を portrait て confirm し た. After repair の organization を home 兎 の macular hole has drifted back towards &yen; モ デ ル に し seaborne て amniotic を scions into し の 2 mm diameter hole has drifted back towards &yen; department に の amniotic membrane with diameter を し lien, postoperative の OCT portrait の に success し た.

项目成果

眼科領域における羊膜移植の現状と展望

羊膜移植在眼科领域的现状与展望

• 发表时间: 2022
• 作者: Miyazawa Kosuke;Sakimoto Susumu;Kanai Masanori;Shiraki Akihiko;Takahashi Shizuka;Shiraki Nobuhiko;Maruyama Kazuichi;Sakaguchi Hirokazu;Nishida Kohji;高橋静;田中 寛
• 通讯作者: 田中 寛

羊膜上で培養したヒトMuller細胞の形態と遊走能および接着能

羊膜培养人Muller细胞的形态、迁移和粘附能力

• 发表时间: 2022
• 作者: 38.宮谷崇史 ;田中寛 ;中村隆宏 ;堀切智子 ;新開陽一郎 ;小嶋健太郎 ;外園千恵
• 通讯作者: 外園千恵