大腸菌増殖定常期および緊縮応答時に特異的なσ因子、σ^<38>の発現調節

在大肠杆菌生长稳定期和严格性响应期间调节特定 σ 因子 σ^<38> 的表达

• 批准号: 06760073
• 负责人: 田中 寛
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06760073/
• 关键词: Escherichia coli; RNA polymerase; sigma factor; trans cription; ppGpp; stationary phase; stringent response; promoter

(1)rpoS遺伝子の発現はこれまでに、転写、翻訳、翻訳後の蛋白質安定性の少なくとも3段階で制御されていることが知られている。ppGppを欠く大腸菌株(ΔrelA、ΔspoT)においては、菌体内にRpoS蛋白質が蓄積しないことが知られている。その分子機構を調べるため、rpoS遺伝子上流部分にlacZ遺伝子を連結し、転写および翻訳レベルでの融合遺伝子を作製、ラムダファージを利用したベクターを用いて1コピーで染色体上に導入した。その結果、ppGppを欠く株において、rpoS遺伝子の転写活性が90%程度低下していることが明かとなり、少なくともppGppがrpoS遺伝子の転写を正に制御していることが判明した。これはrpoS遺伝子の主要な転写を司るP2プロモーターが、ppGppにより正に制御されるヒスチジン合成系のプロモーターと相同性を示すこととよく一致した。(2)RpoS遺伝子産物を含むRNAポリメラーゼホロ酵素(Eσ^<38>)のプロモーター認識特異性について、様々な改変プロモーターを用いたin vitroにおける解析を行なった。その結果、Eσ^<38>がとEσ^<70>同様の-10コンセンサス配列を認識することが明らかになった。即ち、TATAATをコンセンサスとするプロモーター配列は、これら2種のホロ酵素により共通に認識される。

(1) The protein stability of rpoS protein after transcription, transcription, translation and translation is controlled by three stages. ppGpp is not suitable for E. coli strains (ΔrelA, ΔspoT). The molecular structure of the gene is regulated by the upstream part of the rpoS gene. The gene is linked to the upstream part of the rpoS gene. The fusion gene of the rpoS gene is controlled by the upstream part of the rpoS gene. The gene is introduced into the chromosome. As a result, ppGpp was found to be 90% less active than rpoS, and ppGpp was found to be 90% less active than rpoS. The main characteristics of this rpoS gene are as follows: P2, ppGpp, positive control, synthesis, identity, etc. (2)RpoS gene product contains RNA, enzyme (Eσ^<38>), cognitive specificity, and application in vitro analysis. The result is that Eσ <38>^is the same as Eσ^<70>. That is, TATAAT is a common enzyme for two kinds of enzymes.

项目成果

Kan Tanaka: "Cloning,analysis and expression of an rpoS homologue gene from Pseudomonas aeruginosa PA01" Gene. 150. 81-85 (1994)

Kan Tanaka：“铜绿假单胞菌 PA01 的 rpoS 同源基因的克隆、分析和表达”基因。

Kan Tanaka: "Promoter determinants for Escherichia coli RNA polymerase boloenzyme containing σ^<38>(the rpoS gene product)" Nucleic Acids Research. (in press).

Kan Tanaka：“含有 σ^<38>（rpoS 基因产物）的大肠杆菌 RNA 聚合酶酶的启动子决定因素”核酸研究（正在出版）。

A.Abe: "Regulation of spvR gene expression of Salmonella virulence plasusid pKDS50 in Salmonella Choleraesuis serovar Choleraesuis" Molecular Microbiology. 12. 779-787 (1994)

A.Abe：“猪霍乱沙门氏菌血清型霍乱沙门氏菌毒力质粒 pKDS50 的 spvR 基因表达的调节”分子微生物学。

Masaya Fujita: "Transcription of the principal sigma-factor genes,rpoD and rpoS,in Pseudomonas aeruginosa is controlled according to the growth phase" Molecular Microbiology. 13. 1071-1077 (1994)

Masaya Fujita：“铜绿假单胞菌中主要 sigma 因子基因 rpoD 和 rpoS 的转录是根据生长阶段控制的”《分子微生物学》。

Yuko Takayanagi: "Structure of the 5′ upstream region and the regulation of the rpoS gene of Escherichia coli" Molecular and General Genetics. 243. 525-531 (1994)

高柳裕子：“大肠杆菌 5 上游区域的结构和 rpoS 基因的调节”《分子与普通遗传学》243. 525-531 (1994)。