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歯小嚢に発現するlncRNAを介したIGFシグナル応用新規歯周組織再生療法の樹立

通过牙囊中表达的lncRNA应用IGF信号建立新型牙周组织再生疗法

基本信息

批准号：
22K17042
负责人：
御手洗裕美
金额：
$ 3万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K17042/
关键词：
歯根膜歯根膜幹細胞 IGF 歯周組織再生 lncRNA

项目摘要

歯胚発生期に着目してオミックス解析により、歯髄組織のオリジンである歯乳頭組織と比較して、歯根膜組織のオリジンである歯小嚢組織におけるIGFシグナル関連因子の発現が高いことを確認した。そのため、歯根膜発生・形成におけるIGF関連因子の発現と機能解析することで、歯根膜発生機構の一端を解明し、さらに歯根膜組織再生への応用を検討することを目的として、研究を進めた。ヒト歯根膜幹細胞において、マウス歯小嚢組織で発現が高いIGF関連因子の遺伝子発現について半定量的ならびに定量的RT-PCRにて検討した。その結果、一部の遺伝子のみ発現が認められ、特に、あるIGF関連因子（因子X）の遺伝子発現が高いことを明らかにした。そこで、マウス胎生18日齢の歯胚における因子Xのタンパク発現を確認するため免疫組織化学染色を行ったところ、因子Xがマウス歯小嚢組織に発現していることを明らかにした。また、ヒト歯根膜幹細胞を各種条件で培養し、因子Xの遺伝子発現を定量的RT-PCRで解析した。まず、石灰化誘導培地でヒト歯根膜幹細胞の培養を行ったところ、因子Xの遺伝子発現が有意に減少した。次に、歯根膜関連因子の発現制御に重要な成長因子TGF-β1をヒト歯根膜幹細胞に添加すると、因子Xの発現が有意に上昇した。さらに、ヒト歯根膜幹細胞にメカニカルストレス（伸展刺激）を加えたところ、成長因子TGF-β1ならびに因子Xの遺伝子発現がコントロール群と比較して有意に上昇した。これらのことから、IGF関連因子のうち、因子Xは咬合力などの機械的刺激を受け、石灰化が制御された歯根膜組織において重要な機能を有する可能性が示唆された。

The development of IGF related factors in dental tissue was confirmed by comparison with that in dental papilla tissue during the development of dental embryo. The development and function analysis of IGF related factors in the development and formation of dental root membrane are discussed. A semi-quantitative and quantitative RT-PCR assay was performed to detect the expression of IGF-related factors in dental root membrane stem cells. As a result, a part of the gene expression is recognized, and a part of the gene expression is recognized. Immunohistochemical staining was performed to confirm the presence of factor X in the 18-day-old fetus. The quantitative RT-PCR analysis of factor X gene expression in cultured root membrane stem cells under various conditions Culture of root membrane stem cells induced by calcium and lime was studied. The expression of factor X gene was decreased intentionally. In addition, the expression of TGF-β1, an important growth factor in the regulation of root membrane-related factors, is increasing intentionally in root membrane stem cells. The expression of TGF-β1 and factor X in root membrane stem cells was increased intentionally compared with that of root membrane stem cells. The possibility that the IGF related factors, factor X, and occlusal forces are mechanically stimulated and calcified to control the important functions of the root membrane tissue is demonstrated.