炎症性骨破壊におけるプロテアーゼによる破骨細胞分化促進作用の解析

蛋白酶促进破骨细胞分化对炎性骨破坏的作用分析

• 批准号: 22K17216
• 负责人: 杉崎 リサ
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Tokyo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K17216/
• 关键词: プロテアーゼ; オステオプロテゲリン; 炎症; 骨破壊

in vivo の実験として顎骨感染モデルマウスの確立、LPS誘発マウス頭蓋骨炎症モデルの解析を行っている。顎骨感染モデルマウスに関しては繰り返し実験を行い、モデルマウスの確立がされつつある。LPS誘発マウス頭蓋骨炎症モデルでは、LPSを様々な濃度で投与しているが、炎症が誘発されずモデルマウスの確立がされていない。in vitro の実験として骨芽細胞および破骨細胞に由来する新たなプロテアーゼのOPG分解能を解析する。OPGを分解する新たなプロテアーゼとして応募者は骨芽細胞由来のMMP-9、破骨細胞由来のカテプシンKに着目した。 MMP-9およびカテプシンKのOPG分解能をWestern Blottingにて評価を行なったが、MMP-9はOPGを分解しなかったが、カテプシンKは濃度依存的にOPGを分解した。カテプシンKとの反応により生成されたオステオプロテゲリンの３７ｋフラグメントは、反応時間に応じて、１３ｋフラグメントを含む低分子量フラグメントにさらに分解された。 ３７ｋフラグメントの N 末端アミノ酸配列は、オステオプロテゲリンと一致し、カテプシンKがオステオプロテゲリンのデス ドメイン様領域を優先的に加水分解し、RANKL 結合能を消失すると考えられた。 最後に、カテプシンKは、オステオプロテゲリンの添加によって抑制された RANKL 依存性破骨細胞分化を回復させ、テプシンKは破骨細胞形成の正の調節因子であることが示唆された。

In vivo, the development of jaw infection, LPS induction and analysis of cranium inflammation Jawbone infection is not established. LPS induces cranium inflammation and LPS concentrations induce cranium inflammation and inflammation. In vitro, osteoblasts and osteoclasts were analyzed for their new properties. OPG is a new type of osteoclast and MMP-9. MMP-9 and OPG decomposition can be evaluated by Western Blotting, MMP-9 and OPG decomposition can be determined by concentration. The reaction time is 37k, the reaction time is 13 k, and the reaction time is 13k. 37k. The N-terminal amino acid sequence of the protein is characterized by preferential hydrolysis and disappearance of RANKL binding energy. Finally, the expression of the regulatory factors inhibiting RANKL-dependent osteoclast differentiation and osteoclast formation was investigated.

项目成果

Cathepsin K degrades osteoprotegerin to promote osteoclastogenesis in vitro

组织蛋白酶 K 降解骨保护素促进体外破骨细胞生成

• 发表时间: 2023
• 期刊: In Vitro Cellular & Developmental Biology - ANIMAL
• 作者: Ryota Kawai ;Risa Sugisaki ;Yoichi Miyamoto ;Fumiko Yano ;Kiyohito Sasa ;Erika Minami ;Koutaro Maki ;Ryutaro Kamijo
• 通讯作者: Ryutaro Kamijo