II 型子宮体癌モデル培養細胞株の創出と発癌および悪性化機序の解明

II型子宫内膜癌模型细胞系的建立及癌变恶变机制的阐明

• 批准号: 22K18202
• 负责人: 齋藤 菜緒
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Kanagawa Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K18202/
• 关键词: II 型子宮体癌; モデル培養細胞株; II型子宮体癌; 発癌

II 型子宮体癌は、萎縮内膜から遺伝子変異の蓄積を経て悪性度の高い浸潤癌に至るとされている。代表的な組織型である漿液性癌とその初期病変である漿液性子宮内膜上皮内癌において、高頻度に認められる遺伝子変異は複数確認されているが、難治性希少癌であることから基礎研究に使える培養細胞株や動物モデルがないため、それらの発癌およびその悪性化に寄与する分子遺伝学的異常は十分には特徴づけられていない。そこで本研究では、マウス正常子宮内膜の上皮細胞をベースに複数の点変異導入を組み合わせて行うことによって、腫瘍形成初期段階における病態形成過程を再現するII型子宮体癌モデル培養細胞株を作成し、発癌および悪性化における遺伝子異常の関連性とその分子機序を明らかにすることを目的とする。初年度は、マウス子宮内膜上皮細胞の採取と細胞作成条件の検討を実施した。子宮内膜上皮細胞の採取には、マウスから摘出した子宮をトリプシン処理および緩徐なボルテックスを繰り返すことによりシート状の上皮細胞群を得る方法を採用した。採取した細胞を用いて上皮マーカーおよび間質マーカーを免疫蛍光染色した結果、初回のボルテックスにより得られた細胞群において、上皮マーカー陽性細胞群を高収率で採取することに成功した。2 回目以降のボルテックスでは、上皮細胞の収率低下が認められたため、初回のボルテックス処理後の細胞群のみ、実験に採用することにした。現在、得られた上皮細胞群を用いて遺伝子導入効率を上げる条件検討を実施している。また、本研究の目的である点変異ゲノム編集には、CRISPR/Cas9システムを採用している。点変異のゲノム編集はノックアウトよりも確率が大きく低下することから、上記の遺伝子導入効率条件を確立する間にマウス線維芽細胞株であるMEFを用いて編集効率向上を試みている。

Type II uterine body cancer 伝, atrophied endometrium ら, 伝 offspring mutation, <s:1> accumulation を, て悪 degree of <s:1> high <s:1> <s:1> invasive cancer に to るとされて る る. Of representative な organised で あ る serous carcinoma と そ の early disease - で あ る serous temper intrauterine membrane intraepithelial carcinoma に お い て, high frequency に め ら れ る heritage 伝 sub - different は plural confirm さ れ て い る が, refractory rare cancer で あ る こ と か ら に make basic research え る culture cell lines や animal モ デ ル が な い た め, そ れ ら の 発 carcinoma お よ び そ の 悪 に send sexual The abnormal <s:1> of する molecular heritage 伝 is very に に characteristic, づけられて な な な. そ こ で this study で は, マ ウ ス normal endometrial epithelial cells の を ベ ー ス に plural の point group - different import を み わ せ て line う こ と に よ っ て, swollen sores formed Duan Jie に お け る pathological formation を reappearance す る II uterine body carcinoma モ デ ル culture cell lines を made し, 発 carcinoma お よ び 悪 sexualising に お け る heritage 伝 child abnormal の masato even sex と そ の points The sequence of the sub-machine を states ら にする にする とを purpose とする. In the first year, the endometrial epithelial cells of と and ウス were used to form the condition of と cells. Youdaoplaceholder2 was applied to を and た was used. Endometrial epithelial cells の take に は, マ ウ ス か ら pick the し た uterus を ト リ プ シ ン 処 Richard お よ び slow xu な ボ ル テ ッ ク ス を Qiao り return す こ と に よ り シ ー ト の epithelial cells group を を る method takes し た. Take し た cells を using い て epithelial マ ー カ ー お よ び interstitial マ ー カ ー を 蛍 light dye し た results, back to the early の ボ ル テ ッ ク ス に よ り have ら れ た cells に お い て, epithelial マ ー カ ー positive cells rate of high を 収 で take す る こ と に successful し た. 2 in pa2 の ボ ル テ ッ ク ス で は, epithelial cells の 収 rate low が recognize め ら れ た た め, back to the early の ボ ル テ ッ ク ス 処 の cells after Richard の み, be 験 に using す る こ と に し た. Now, have to ら れ た を epithelial cell populations with い て heritage 伝 son import working rate on を げ 検 る conditions for を be applied し て い る. Youdaoplaceholder0, the objective of this study is to compile the である point variations ゲノム に る, and CRISPR/Cas9システムを uses て て る る. Compiling は points - different の ゲ ノ ム ノ ッ ク ア ウ ト よ り も probabilistic が big き く low す る こ と か ら, written の heritage 伝 son import を sharper rate conditions established す る between に マ ウ ス line d bud cell lines で あ る MEF を with い try compiling sharper rate upward を て み て い る.

项目成果

Differential DNA-binding and cofactor recruitment are possible determinants of the synthetic steroid YK11-dependent gene expression by androgen receptor in breast cancer MDA-MB 453?cells

差异DNA结合和辅因子募集可能是乳腺癌MDA-MB 453细胞中雄激素受体合成类固醇YK11依赖性基因表达的决定因素

• DOI: 10.1016/j.yexcr.2022.113333
• 发表时间: 2022
• 期刊: Experimental Cell Research
• 影响因子: 3.7
• 作者: Kanno Yuichiro;Saito Nao;Saito Ryota;Kosuge Tomohiro;Shizu Ryota;Yatsu Tomofumi;Hosaka Takuomi;Nemoto Kiyomitsu;Kato Keisuke;Yoshinari Kouichi
• 通讯作者: Yoshinari Kouichi

二次元および三次元培養における子宮頸部腺がんの放射線感受性評価

二维和三维培养宫颈腺癌的放射敏感性评估

• 发表时间: 2022
• 作者: 関原和正;氷室秀知;齋藤菜緒;太田幸秀;星野大輔
• 通讯作者: 星野大輔

Validation of EZH2 Inhibitor Efficiency in Anaplastic Thyroid Carcinoma Cell Lines

EZH2 抑制剂在甲状腺未分化癌细胞系中的有效性验证

• DOI: 10.21873/anticanres.16252
• 发表时间: 2023
• 期刊: Anticancer Research
• 影响因子: 2
• 作者: NAKAYAMA HIROTAKA;SAITO NAO;KASAJIMA RIKA;SUGANUMA NOBUYASU;RINO YASUSHI;MASUDO KATSUHIKO;YAMAZAKI HARUHIKO;TODA SOJI;SEKIHARA KAZUMASA;IWASAKI HIROYUKI;HOSHINO DAISUKE
• 通讯作者: HOSHINO DAISUKE

甲状腺乳頭癌のオルガノイド培養を用いた薬剤感受性および甲状腺分化マーカーの変動

使用甲状腺乳头状癌类器官培养物检测药物敏感性和甲状腺分化标志物的变化

• 发表时间: 2022
• 作者: 齋藤菜緒;菅沼伸康;戸田宗治;岩崎博幸;関原和正;星野大輔
• 通讯作者: 星野大輔

The antitumor effect of carbon ion irradiation in three-dimensional spheroids from cervical adenocarcinoma.

碳离子照射对宫颈腺癌三维球体的抗肿瘤作用。

• 发表时间: 2022
• 作者: Kazumasa Sekihara;Hidetomo Himuro;Nao Saito;Yukihide Ota;Tetsuro Sasada;Daisuke Hoshino
• 通讯作者: Daisuke Hoshino