破骨細胞分化に対するトロンボポエチンの抑制効果についての研究

血小板生成素抑制破骨细胞分化作用的研究

• 批准号: 09770827
• 负责人: 日野 雅之
• 金额: $ 0.32万
• 依托单位: Osaka City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770827/
• 关键词: thrombopoietin; osteoclast; transforming growth factor-β; platelet derived growth factor; Platelet derived growth factor

Thrombopoietin(TPO)は巨核球系前駆細胞に作用し、血小板への分化を誘導するcytokineで、巨核球、血小板系細胞に特異的に作用すると思われていたが、TPOの受容体であるc-mplは種々の造血細胞に発現しており、TPOが好中球機能を刺激すること、赤芽球系細胞の増殖、分化を刺激すること、多能性幹細胞を維持することなど、TPOが種々の細胞に作用する可能性が報告されてきた。MTT法を用いて、白血病細胞増殖刺激作用を検討すると、急性白血病患者の39%がTPOによりin vitroでの増殖が刺激された。またTPOのtransgenic mouseでは骨硬化症が認められている。骨代謝は、骨芽細胞による骨形成と破骨細胞による骨吸収のバランスで調節されており、破骨細胞は、造血細胞と同じ起源の細胞より分化することから、破骨細胞分化に対するTPOの作用を検討した。方法はC3H/HeNマウスより非付着性骨髄細胞を採取し、骨髄間質細胞株ST2と1,25(OH)2D3及びdexamethasone存在下で共培養し、破骨細胞を分化誘導し、TPO添加による影響を検討した。TPOは破骨細胞を用量依存性に低下させた。TPO投与時期をずらしたところ、培養開始時から添加した場合のみ有意な抑制効果が認められた。また、この抑制効果は抗TPO抗体の同時添加により阻害された。上記共培養をウシ大腿骨から作成した骨薄片上で行い、吸収窩を観察した。TPO添加群では吸収窩の数及び面積が減少した。これらの作用が血小板産生刺激による間接作用の可能性について、血小板より産生される(TGF-β、PDGFについて検討した。破骨細胞培養系にTPOとともにTGF-β、PDGFの中和抗体を添加したところ、TPOの破骨細胞分化抑制効果が低下した。さらに、TGF-β、PDGFは破骨細胞分化を用量依存的に抑制した。以上より、TPOはTGF-β、PDGFを介して破骨細胞の分化誘導を初期の分化段階において形態的にも機能的にも抑制すると考えられた。

Thrombopoietin (TPO) acts on pre-megakaryocytic cells and induces platelet differentiation and cytogenesis. okine, megakaryocyte, platelet cell specific に effect すると思われていたが, TPO ceptor であるc-m plは kind of hematopoietic cells are present, TPO is good at spheroid function and stimulates it, and erythroblast lineage cells are proliferated and differentiated. Stimulation of pluripotent stem cells, maintenance of pluripotent stem cells, and possibility of TPO cell action are reported. The MTT method is effective, the leukemia cell proliferation stimulation effect is effective, and the acute leukemia patient's 39% TPO is effective in vitro and the proliferation stimulation effect is effective.またTPOのtransgenic mouseではosteosclerosisがcognizeめられている. Bone metabolism, osteoblasts, bone formation, osteoclasts, bone resorption, regulation, osteoclasts , Hematopoietic cells and cells of the same origin are differentiated and osteoclasts are differentiated and the role of TPO is determined. Method: Non-adherent bone marrow cells and bone marrow mesenchymal cell line ST2と1,25(OH)2D3 were collected And co-cultivation in the presence of dexamethasone, osteoclast differentiation induction, and TPO addition have no effect. The dosage dependence of TPO on osteoclasts is also low. The timing of TPO administration is the same, and the addition of TPO at the beginning of cultivation is not intentional and the suppression effect is not recognized at the appropriate time. The suppressive effect of また and この and the anti-TPO antibody are added at the same time as the によりblocking された. The above-mentioned co-cultivation of femoral bones was carried out, and the bone thin slices were made and the absorption sites were inspected. The addition of TPO can reduce the number and area of ​​absorption cells. Possibility of indirect action of これらのeffectがplatelet production stimulatingによる indirect effectについて, platelet よりproduction される(TGF-β, PDGFについOsteoclast culture system using neutralizing antibodies against TGF-β and PDGF, and osteoclast analysis using TPO. The inhibitory effect of TGF-β and PDGF on osteoclast differentiation is dose-dependent. GF-β and PDGF mediate the induction of differentiation of osteoclasts and the initial stage of differentiation, and inhibit the formation and function of osteoclasts.

项目成果

Takeshi Wakikawa,Atsushi Shioi Masavuki Hino,et al: "Thrombopoietin inhibits in vitro osteoclastogenesis from murine bone marrow cells." Endocrinology. 138. 4160-1466 (1997)

Takeshi Wakikawa、Atsushi Shioi Masavuki Hino 等人：“血小板生成素抑制小鼠骨髓细胞的体外破骨细胞生成。”

Takeshi Wakikawa,Masayuki Hino,et al: "Thrombopoietin inhibits in vitro osteoclastogenesis from murine bone marrow cells." Endocrinology. 138. 4160-4166 (1997)

Takeshi Wakikawa、Masayuki Hino 等人：“血小板生成素抑制小鼠骨髓细胞的体外破骨细胞生成。”

日野雅之: "トロンボポエチンの生理作用の多様性" 臨床病理. 45. 921-926 (1997)

Masayuki Hino：“血小板生成素生理作用的多样性”临床病理学 45. 921-926 (1997)