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新しい癌抑制遺伝子の単離

新抑癌基因的分离

基本信息

批准号：
09780657
负责人：
立石智
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

项目摘要

私はこれまでチャイニーズハムスター培養細胞を用いて、細胞周期のチェックポイント機構に異常を示す変異株を分離してきた。これらの変異株の原因遺伝子の構造と機能を知ることができれば、チェックポイント機構について重要な知見が得られると考え、変異株の原因遺伝子のジェノミックDNAクローニングを行った。ヒト由来のジェノミックDNAを変異株細胞に導入した後、低血清条件下でヌクレオチドアナログに耐性となった細胞(一次トランスフォーマント)を単離した。その細胞から全DNAを回収し、再び最初の変異株に導入し、ヌクレオチドアナログ耐性となった二次トランスフォーマントを単離した。二次トランスフォーマント由来の全DNAを用いてAlu-PCRを行い、ヒトゲノムDNAの一部を得た。そのDNAの配列を調べた結果、データベース上で既知のゲノム配列と1.1kbpほぼ完全に一致した。またこのDNAはほぼすべての一次、及び二次トランスフォーマントに存在していたことから、原因遺伝子を含むジェノミックDNAであると推定された。上記のDNA断片に対応するBACジェノミッククローンを3株単離した。得られたBACクローンを変異株に導入し、無血清条件でのヌクレオチド耐性を調べることにより、これらが原因遺伝子を含むジェノミッククローンであるかどうか調査している。また得られたゲノム配列を遺伝子予測プログラムを用いて、cDNA予測を行った結果、この配列の近傍に数kbの遺伝子が存在することが予測された。更にこの予測された遺伝子は新規の遺伝子であり、既知の癌抑制遺伝子と一部相同性を示し、cDNAとして実在することがわかった。現在、この遺伝子の全長をcDNAライブラリーからクローニングしている。またこの遺伝子は癌抑制遺伝子と一部相同性を示すことから、癌抑制遺伝子であるかどうかについても調査する方向である。

The cell culture system has been used for the purpose of cell culture, cell cycle monitoring, cell culture, cell cycle, cell cycle and cell cycle. It is possible to know that the cause of the disease is the cause of the disease, the reason, the cause, the cause. The reason for the infection was that the DNA strain was isolated after it was introduced into the cell and was isolated under the condition of low serum. In the first place, the whole DNA was transferred back to the cell, and then the plant was isolated from the plant at the beginning. The origin of the whole DNA is to use "Alu-PCR" and "DNA" for the second time. The results of the DNA column matching results, and the previous knowledge that the 1.1kbp column is completely consistent. The first and second times are DNA and secondary. There is a reason for the existence of an error. The cause contains a presumption that there is an error in the DNA. The DNA fragments were isolated from the BAC fragments of 3 isolates. There is no serum condition for BAC infection. The tolerance test is sensitive, the cause is sensitive, and the cause is sensitive. You can get the number of data in the column, the number of kb, the number of children in the column, the number of data in the column, the number of data in the column, the number of people in the column, and the number of data in the column, the number of people in the column, the number of children in the column, the number of children in the column, the number of people in the column, the number of children, the number Please tell me that the new rules and regulations are similar to those of the known cancer suppressants, and that the cDNAs are similar to each other. At present, the total length of the children is very high, and the total length of the child is very high. Now, the full length of the child, cDNA, and so on, is very important. One of the same parts shows that the cancer suppressant child is the same as the cancer suppressor child.