原形質性アストロサイト特異蛋白質の遺伝子クローニング

原生质星形胶质细胞特异性蛋白的基因克隆

基本信息

批准号：
09780702
负责人：
横尾英明
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09780702/
关键词：
アストロサイトモノクローナル抗体免疫組織化学

项目摘要

我々はヒトアストロサイトの細胞同定に役立つ新規の物質の探索を、モノクローナル抗体を開発するという手法で試み、原形質性アストロサイトのミトコンドリアに特異的に発現する蛋白質を認識する抗体を開発し、PRAS-4と名付けた。最終的な目標である遺伝子クローニングにたどり着くことはできなかったが、その傍らで同時に進めてきたテーマでいくつかの知見を得た。一つは、脳腫瘍病理学の世界的権威であるフランスSainte-Anne HospitalのDr.DaumasDuportと共同で進めているテーマで、PRAS-4抗体の脳腫瘍病理診断学への応用である。脳腫瘍の中でもアストロサイト系腫瘍は頻度、悪性度ともに高く、組織型も多彩で、病理医としても診断に難渋することが少なくない。PRAS-4抗体はホルマリン固定パラフィン切片で利用可能で、ルーチンの臨床材料で研究できる利点がある。現時点では結果を公表できる段階ではないが、先方からは有用性が期待されるとの報告を受けている。もう一つは小脳Bergmann細胞とPurkinje細胞を用いたneuro glial interractionに関する研究である。Bergmann細胞におけるPRAS-4抗原は一般的なアストロサイトのマーカーであるGFAPよりも早期から発現されており、培養条件下で通常のアストロサイトとBergmann細胞の識別に役立つ。またグルタミン酸受容体を介したBergmann細胞の細胞内カルシウム調節機構の解析から、PRAS-4抗原蛋白はミトコンドリアにおけるカルシウムのgate keeperの役目があるのではないかという作業仮説を立てるに至った。未完のテーマであるので、今後とも研究を継続する予定である。

我们试图搜索使用开发单克隆抗体的方法，可用于细胞鉴定人星形胶质细胞的新型物质，并开发了一种抗体，该抗体识别在血浆原生质星形胶质细胞的线粒体中特异性表达的蛋白质，并将其命名为Pras-4。尽管我们无法实现基因克隆的最终目标，但我们从同时研究的主题中获得了一些见解。一个主题是我们与法国圣安妮医院的Daumasduport博士合作，这是脑肿瘤病理学的全球管理局，是PRAS-4抗体在脑肿瘤病理学诊断中的应用。在脑肿瘤中，星形胶质细胞肿瘤高度频繁且恶性肿瘤，并且具有多种组织学类型，使病理学家难以诊断它们。 PRAS-4抗体可在福尔马林固定的石蜡切片中获得，并具有可以在常规临床材料中进行研究的优势。在这一点上，结果尚不可用，但另一方报告说它将有用。另一项是使用小脑伯格曼和浦肯野细胞的神经毛发相互作用的研究。 Bergmann细胞中的PRAS-4抗原比GFAP（一种常见的星形胶质细胞标记）表达，可用于区分培养条件下的正常星形胶质细胞和伯格曼细胞。此外，分析通过谷氨酸受体对伯格曼细胞的细胞内钙调节机制进行分析，这使我们提出了一种工作假设，即PRAS-4抗原蛋白可以用作线粒体中钙的栅极饲养者。由于这是一个未完成的话题，我们计划将来继续我们的研究。