自発的に細胞周期を停止するヒト脳腫瘍細胞の分子機構解析

人脑肿瘤细胞自发阻滞细胞周期的分子机制分析

基本信息

批准号：
15700270
负责人：
横尾英明
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年までの研究で我々が明らかにしたことは、(1)シュワン細胞腫には自発的に細胞周期の停止する細胞が出現し、それらは細胞老化と類似な表現型を示している、(2)そのような細胞は好酸性硝子滴を有しており、好酸性硝子滴はニトロチロシン抗原が陽性である、(3)ニトロ化は内在性の一酸化窒素による化学修飾と考えられ、内在性の酸化ストレスが腫瘍細胞の細胞周期の停止をもたらしていると推測される、(4)腫瘍細胞の細胞老化という新しい概念が導入できる可能性がある、などである。これらを踏まえて今年度の研究では腫瘍細胞側の要因、即ちどのような条件が重なった場合にシュワン細胞腫が細胞老化の表現型を獲得するのか、という点について検討した。ニトロチロシン以外の酸化ストレスマーカーとして8-OHdG、4-HNEおよび8-nitroguanosineの発現を検討したが、好酸性硝子滴との明らかな相関はなく、細胞老化の実行因子とされるp38の有意な発現も見られなかった。細胞周期制御の最重要分子であるp53をシークエンス解析した結果、変異を示す症例は1例もなかった。得られた手がかりは多くはないが、自発的に細胞周期が止まるためにはp53の変異のないことが前提で、そこに一酸化窒素のようなある種の酸化ストレスが加わることで細胞周期が停止するというスキームが想定される。オリゴデンドログリオーマについても同様な解析を実施したが有意なデータが得られなかった。同腫瘍の好酸性顆粒は主としてストレス蛋白質から構成されるので、今後は細胞内在性の機序について解析することが必要と思われた。その一環としてオリゴデンドロサイトの表現型を決定している転写因子Olig2の抗体を作製して発現解析をしたところ、抗Olig2抗体はオリゴデンドロサイトとその腫瘍の優れたマーカーであることが判明し、細胞周期研究以外にも幅広い応用が期待された。

What we have revealed in studies up to last year is that (1) cells with spontaneous cell cycle arrests appear in Schwann's cytoma, which exhibit a similar phenotype to cell senescence, (2) such cells have acidophilic hyaline droplets, and acidophilic hyaline droplets are positive for nitrotyrosine antigens, (3) nitration is thought to be a chemical modification by endogenous nitric oxide, and假定内源性氧化应激会导致肿瘤细胞的细胞周期停滞，（4）可以引入肿瘤细胞中细胞衰老的新概念。考虑到这些因素，今年的研究检查了肿瘤细胞侧的因素，即，当Schwann的细胞衰老表型发生时，什么条件重叠。我们研究了8-OHDG，4-HNE和8-硝基瓜氨酸作为硝基苯胺以外的氧化应激标志物的表达，但与嗜酸性玻璃液滴没有明显的相关性，p38没有显着表达，被认为是细胞衰老的激活剂。 p53的序列分析是细胞周期调节的最重要分子，表明该病例均未显示突变。没有得到很多线索，但是为了使细胞周期自发停止，假定p53中没有突变，并且假定一种方案，其中添加了一定的氧化应激，例如添加一氧化氮，从而导致细胞周期停止。对少突胶质瘤进行了类似的分析，但未获得显着的数据。由于肿瘤的嗜酸性颗粒主要由应激蛋白组成，因此似乎有必要分析未来内在细胞的机制。为此，我们生产了转录因子Olig2的抗体，该抗体决定了少突胶质细胞的表型，并分析了表达，发现抗Olig2抗体是少突胶质细胞及其肿瘤的绝佳标记，并且预计将具有广泛的应用程序范围。