放射性トレーサーによる神経受容体のインビボ活性とシナプスの電気生理的活性の相関

放射性示踪剂体内神经元受体活性与突触电生理活性的相关性

• 批准号: 09780723
• 负责人: 小林 薫
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09780723/
• 关键词: 神経受容体; インビボ; RIトレーサー法; 集合興奮性シナプス膜電位; シナプス; 歯状回顆粒神経細胞; 神経受容体結合; 海馬; 海馬顆粒細胞; 集合シナプス電位

本研究ではRIトレーサー法で観測されるインビボ受容体結合活性と、中枢神経系における情報伝達との関連を検討する目的で、単シナプスの情報伝達に焦点をあて、特定の神経シナプス(海馬歯状回顆粒神経細胞のグルタミン酸シナプス)のレスポンスを計測するために、上記シナプスの前繊維の電気刺激により放出されるグルタミン酸がシナプス後細胞に発生させる興奮性シナプス膜電位(EPSP)を測定した。具体的には海馬穿通枝に刺入した単極電極を電気刺激発生装置により刺激し、海馬歯状回顆粒細胞の集合EPSP(pEPSP)を記録電極より測定した。まず電気的な測定の感度及び安定性を向上させるため、ラット頭部直上に配置し電極からの微弱信号を至近で増幅し安定送信させるブリアンプの作成を行った。入力部にFETを利用した超低ノイズOPE-Amp INA110(外形6x5xlmm)を乾電池駆動で利用し超高インピーダンス入力、低インピーダンス出力を実現した。その結果、従来から多く用いられているFETのみで作成されたプリアンプに比べ雑音レベルが1/10に低下するとともに、ラットの動きやその他のノイズ源に対する出力信号の安定性が格段に向上した。取り込んだ信号の解析は、刺激に同期してADコンバータによりコンピューターに取り込んだ信号を、処理し、刺激からpEPSP立ち上がりまでの時間、pEPSPの立ち上がり勾配、波高などを自動で解析するシステムを構築した。RIトレーサー法に関する検討では受容体作動薬が受容体を占有する様子をRIトレーサーにより測定する方法論について基礎的検討を加え、べンゾジアゼピン系薬物の受容体への結合をインビボで測定する方法を確立した。また直接はRIトレーサーが結合する受容体に作用しない薬物がインビボにおいては受容体の結合を変化させることをいくつかの薬物やトレーサーについて見いだした。今後この全く異なった2つの系における様々な現象がどの様な相関を示すかをより詳細に検討する予定である。

In this study, we investigated the relationship between receptor binding activity, central nervous system information transmission, and the relationship between receptor binding activity, central nervous system information transmission, and central nervous system information transmission. The excitatory membrane potential (EPSP) of hippocampal dentate ganglion neurons was measured during the electrical stimulation of the neurons before and after the release of the neurons. Specifically, the hippocampus penetrating branch is pierced by a single electrode, and the electrical stimulation generator is used to stimulate and record the collection of hippocampal dentate granule cells (pEPSP). The sensitivity and stability of the measurement of the electric current are improved, the electrode is arranged directly above the head, the weak signal is increased, and the stable transmission is improved. The power input FET uses ultra-low power OPE-Amp INA110(6x5xlmm) to realize dry cell operation using ultra-high power input and low power output. As a result, the stability of the output signal is 1/10 lower than that of the output signal of the FET, which is used in many applications, and the stability of the output signal is higher than that of the FET. Select signal resolution, stimulus timing, stimulus timing, pEPSP timing, pEPSP alignment, wave height resolution, etc. The method of RI determination is to establish a method for determining the combination of receptor activation and receptor occupancy. In addition, it can be used to directly control the interaction between the receptor and the substance. In the future, the phenomenon of complete difference between two systems will be discussed in detail.

项目成果

Hosoi.R: "Discrepancy of benzodeazepaine receptor ocoupancy between ^3H-Flumazoril and ^<125>I-Iomasenil in mtect mouse brain." J.Neural Transm. (印刷中).

Hosoi.R：“mtect 小鼠大脑中 ^3H-Flumazoril 和 ^<125>I-Iomasenil 之间苯并氮卓受体占有率的差异。”（J.Neural Transm）。

Jnoue.O.: "Opposing effect of clomipramine on 〔^<125>I〕RTI-55 and 〔^3H〕N-methlspipenne binding in mouse strcher Inportant role of offier factors than endogenouse dopamine" Synaps. 30. 338-340 (1998)

Jnoue.O.：“氯米帕明对小鼠strcher中[125]RTI-55和[13H]N-甲基哌啶结合的相反作用比内源性多巴胺更重要的因素”Synaps。 1998）

Kobayashi.K: "Canges in apparent in vivo binding of 〔^3H〕raclopride and 〔^3H〕N-methylspiperone mduced by oxofreinorine" J.Neural. Transm. 105. 1193-1197 (1998)

Kobayashi.K：“oxofreinorine 引起的 [^3H] 雷氯必利和 [^3H] N-甲基螺哌隆的明显体内结合的变化”J.Neural。105. 1193-1197 (1998)