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酵母を利用した必須脂肪酸代謝における分子機構の解析

利用酵母分析必需脂肪酸代谢的分子机制

基本信息

批准号：
10760052
负责人：
秋庸裕
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10760052/
关键词：
脂質高度不飽和脂肪酸不飽和化酵素シトクロムb5 酵母内発現

项目摘要

動物において必須脂肪酸として摂取されたリノール酸とα-リノレン酸は,独立した二系列の多段階酵素系によってアラキドン酸とエイコサペンタエン酸及びドコサヘキサエン酸にそれぞれ変換される。これら多価不飽和脂肪酸は生体膜脂質の構成成分であるだけでなく,動脈硬化,炎症や老化などに関連する重要な生理活性物質であり,その代謝調節機構は今後解明すべき重要な課題の一つである。本研究では,全く解明されていなかったその代謝系酵素群のうち,最初の脂肪酸不飽和化反応を司るΔ6不飽和化酵素の遺伝子をラット肝臓から単離し,同定した。本遺伝子は最長444アミノ酸のタンパク質をコードしうる全長1573塩基対を含んでおり,その開始コドンから終止コドンまでを含む遺伝子断片を酵母内発現系に供したところ,リノール酸あるいはα-リノレン酸の存在下で,それぞれのΔ6不飽和化産物であるγ-リノレン酸及びC18:4n-3を新たに生成した。推定アミノ酸配列には,他種由来の脂肪酸不飽和化酵素に共通して見出される3つのhistidine boxを含み,N末端部分にはcytochrome b5と高い相同性を示す領域が存在していた。そこで,cytochrome b5欠損酵母内で同様に発現解析を行ったところ,Δ6不飽和化活性が検出され,宿主由来のcytochrome b5分子が必ずしも必要でないことが分かった。また,cytochrome b5相同領域のHPGGモチーフにおけるヒスチジン残基をアラニンで置換した変異体がΔ6不飽和化活性を示さなかったことは,この領域がcytochrome b5として機能している可能性を示唆した。

It is necessary for the animal to have fatty acids. It is necessary for the fatty acids to be extracted from the fatty acids, and the two series of enzymes must be independent of each other. The two series of enzymes must be separated from each other. The body membrane lipids are composed of fatty acids and fatty acids. The components of body membrane lipids are known to be insoluble, sclerotic, inflammatory, aging, and important physiologically active substances. In the future, the agency will solve the important problems in the future. The purpose of this study is to understand that there is a system of enzymes in the system of enzymes, fatty acids, fatty acids, Δ 6, and enzymes. The maximum length of the yeast is 444. The total length of the total temperature is 1573. The total temperature is 1573. The total temperature of the yeast is the highest. The total temperature of the yeast is 444. The total length of the yeast is 1573. The chemical compounds, such as γ-ray, acid and C18:4n-3, are used to form the new compounds. It is presumed that there is a high concentration of cytochrome b5 in the N-terminal region, and the homogeneity of the N-terminal portion of cytochrome b5 indicates that there is a molecular weight in the field. Cytochrome b5 is deficient in yeast homology analysis, Δ 6 dissociation activity is sensitive, and the host cytochrome b5 molecule is necessary. In the same field, cytochrome b5 has been shown to be sensitive to the presence of residues in the same field, and the chemical activity has been shown to show that it is possible to use cytochrome b5 in the same field.