大豆β-コングリシニン主要サブユニットのアレルゲン性に対する消化・吸収性の関与

消化吸收与大豆β-伴大豆球蛋白主要亚基致敏性的关系

• 批准号: 10760082
• 负责人: 室田 佳恵子
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10760082/
• 关键词: アレルゲン; 大豆; β-コングリシニン; 消化抵抗性; 粘膜透過性; Caco-2; 消化低抗性; βコングリシニン; モノクローナル抗体

大豆に含まれるタンパク質のうち、アレルギー患者血清と反応する主要なものの一つにβ-コングリシニンのα-サブユニットがある。β-コングリシニンは一次構造の非常に類似した主要な3つのサブユニット(α、α'、β)から構成されているが、これらのうちα-サブユニットが特に強いアレルゲン性を示す。そのような差異をもたらす要因の一つとして消化・吸収性の違いが考えられる。本年度は、各サブユニットの消化管粘膜透過能について検討した。実験系として、ヒト結腸癌由来の培養細胞で小腸での消化・吸収を研究する上で広く利用されているCaco-2細胞を選択透過性フィルター上に培養したものを用いた。脱脂大豆より精製したβ-コングリシニンの3つのサブユニットの水溶液を細胞層の粘膜側(小腸管腔側)に与え、3時間インキュベートした後、SDS-PAGEにて細胞層透過液中のタンパク質を検出したが、各サブユニットと考えられるタンパク質はあってもごく微量であった。そこで昨年度に作製したモノクローナル抗体を用いてウェスタンブロットによる検出を試みたところ、α-およびα'-サブユニットが検出され、β-サブユニットに比べて細胞層を透過しやすいことが示唆された。これらの分子が細胞層の透過性に与える影響を経上皮電気抵抗(TEER)を指標に測定したところ、α-およびα'-サブユニットはインキュベート初期にTEERを低下させる傾向が見られた。すなわち、これら2種のサブユニットはβ-サブユニットに比べて小腸粘膜透過性が若干ではあるが高いことが示唆された。昨年度行った消化抵抗性に関する実験では、β-サブユニットが最も消化されにくかったが他のサブユニットにおいても比較的抵抗性の高い中間産物が見られており、以上のような消化・吸収性の違いが複合的に作用して、アレルゲン性の差異を形成していると考えられる。

Soybean contains a variety of substances, such as β-glucagon and α-glucagon. The β-C structure is very similar to that of the primary structure. The main structure of β-C structure is (α, α', β). The difference between the two is due to a combination of digestion and absorption. This year, the digestive tract mucosa permeability of all kinds of Caco-2 cells are used in the study of digestion and absorption of cultured cells from colon cancer. Defatted soybean is purified by β-cyclodextrin and purified by SDS-PAGE after 3 hours of aqueous solution on the mucosal side of the cell layer (intestinal lumen side). In the past year, the production of anti-tumor antibodies has been studied. The detection of anti-tumor antibodies has been studied. The permeability of the cell layer and the tendency of the cell layer to decrease TEER were measured. 2 kinds of small intestine mucosa permeability In the past year, the digestive resistance of the digestive system was related to the formation of high intermediate products with high resistance to digestion and absorption, and the formation of high intermediate products with high resistance to digestion.

项目成果

小川正、室田佳恵子、坂東紀子: "大豆β-コングリシニンおよびその構成サブユニット(α、α'、β)間のたん白質化学的構造特異性が生体に及ぼす免疫学的活性の解析"大豆たん白質研究. 1. 69-74 (1998)

Tadashi Okawa、Kaeko Murota、Noriko Bando：“大豆 β-伴大豆球蛋白的免疫活性及其组成亚基（α、α、β）对活体生物体的蛋白质化学结构特异性的分析”大豆蛋白质研究 1. 69-。 74 (1998)

小川正,室田,佳恵子,板東紀子: "大豆βコングリシニンおよびその構成サブユニット(α,α',β)間のたん白質化学的構造特異性が生体及ぼす免疫学的活性の解析にアレルゲン性に対する消化・吸収性の関与" 大豆たん白質研究. 1. 69-74 (1998)

Tadashi Okawa、Keiko Murota、Noriko Bando：“分析大豆 β-伴大豆球蛋白的免疫活性及其体内组成亚基（α、α、β）之间的蛋白质化学结构特异性及其致敏性”·参与吸收”蛋白质研究。1。69-74（1998）