サケ成長ホルモン遺伝子の組み換えによるサケ、マスの巨大成長に関する研究

重组鲑鱼生长激素基因研究鲑鱼和鳟鱼的巨型生长

• 批准号: 10760113
• 负责人: 森 司
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10760113/
• 关键词: トランスジェニックサーモン; GH; トランスジェニックフィッシュ; サーモン

ベニザケGH1遺伝子をメタロチオネインプロモターに接続したベクターOnMTGH1を用いた組み換えサケは著しく成長速度が早まり(約40倍)、頭部や鰓などで形態形成異常が起こることが知られている。また、その成長過程で血中GHも高くなることが判っているが、この著しく成長促進が見られる魚の組織で外来GH遺伝子がどのように発現しているのかを調べることを目的とした。その結果、外来GH遺伝子はほとんど全ての組織(特に脾臓、腸、幽門睡)で発現し、その量は成長の初期の幼魚期にノーザンハイブリダイゼーションで検出できるほど高く、その後検出不可能なほど低下した。しかし、RT-PCRを行うと全ての時期で発現していることが明らかになった。また、この遺伝子組み換えサケの脳下垂体はコントロール魚のそれと比べると約1/3に縮小し、さらに脳下垂体のGH遺伝子発現量も著しく減少することが判った。この研究を通して、実は遺伝子を導入していないコントロールのサケにおいても脳下垂体以外の組織で成長ホルモン遺伝子の発現が見られることが判った。この遺伝子を取り出し塩基配列の解析をしてみると、GH1遺伝子を導入しているサケにおいては少なくともGH2タイプの遺伝子は発現していることが判明した。また、コントロールのサケではGH1タイプの遺伝子も発現していることが最近判ってきたが、その発現量の差に関しては現在調べている最中である。ただ、頭骨形成や鰓に関しての成長異常に関与するsonic hedgehogやHoxD4遺伝子との関係をうまく調べることが出来なかった。

使用载体ONMTGH1的重组鲑鱼，其中红鲑鱼GH1基因连接到金属硫蛋白启动子，生长速度明显更快（大约40次），并且已知头部和g在头部和Gill中发生形态发生。还发现，在生长过程中，血液GH也增加了，但目的是研究外国GH基因如何在明显促进生长的鱼类组织中表达。结果，外国GH基因在几乎所有组织（尤其是脾脏，肠和幽门睡眠）中表达，并且在生长的早期阶段通过北部杂交检测到其量，然后不确定地降低。但是，RT-PCR揭示了它始终表达。还发现，这种转基因鲑鱼的垂体已减少了对照鱼的三分之一，并且垂体中的GH基因表达水平也显着降低。通过这项研究，发现即使在未引入基因的对照鲑鱼中，在垂体以外的组织中也观察到生长激素基因表达。在提取该基因并分析基础序列后，发现至少GH2型基因在鲑鱼中表达，该基因已与GH1基因一起引入。最近还发现，对照鲑鱼也表达GH1型基因，但是我们目前正在研究表达水平的差异。但是，我们无法正确研究Sonic刺猬和Hoxd4基因之间的关系，这些基因与颅骨形成和g的异常生长有关。

项目成果

Tsukasa Mori: "Transgen and host growth hormone gene expression in pituitary and nonpituitary Tissues of normal and growth hormone transgenic salmon"Molecular and Cellular Endocrinology. 149. 129-139 (1999)

Tsukasa Mori：“正常和生长激素转基因鲑鱼的垂体和非垂体组织中的转基因和宿主生长激素基因表达”分子和细胞内分泌学。