课题基金 / 基金详情

アセチルコリン活性化非選択的カタイオンチャンネルのクローニングと機能発現

アセチルコリン活性化非選択的カタイオンチャンネルのクローニングと機能発現
乙酰胆碱激活的非选择性阳离子通道的克隆及功能表达
批准号：
10770020
负责人：
山下 俊一
金额：
$1.22万
依托单位：
Nihon University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1998 至 1999
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770020/
关键词：
アセチルコリンカタイオンチャンネル気管平滑筋ブタクローニング気管平滑筋細胞

项目摘要

项目成果

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中文摘要
翻译
昨年度は、ブタ気管平滑筋から採取精製したpoly(A)^+RNAによりアフリカツメガエルの卵母細胞上にアセチルコリン活性化非選択的カタイオンチャンネル(Ins-ACh)を再構成できることを確認した。そこで、本年度はまずpoly(A)^+RNAを密度勾配遠心法で分画し、Ins-AChが最大となる分画を得た。この分画からcDNAライブラリーを作製し、E.coliに導入した後、in vitro合成されたmRNAを卵母細胞に注入して観察されるIns-AChの有無を示標にライブラリーのスクリーニングを行った。しかしながら、得られたmRNAではIns-AChが全く確認できない、あるいはスクリーニング中にIns-AChを発現するクローンを見失う等の困難が連続した。その度にcDNAライブラリーを作製し直し、新しいデーター取得解析装置(AXON社DigiPack1200)を導入するなどしてスクリーニングの効率化を図った。Ins-AChを発現するクローンを単離する作業は、実験系を改良しながら現在も継続中である。今後は、得られたcDNAを解析することによりIns-AChの一次構造を決定し、卵母細胞上でキネティクス、Ca^<2+>感受性、チロシンキナーゼ依存性、百日咳毒素感受性について生筋のIns-AChの特性を備えていることを確認してゆく予定である。本研究の成果はCan.J.Physiol.Pharmacol.に発表した。
英文摘要
昨年度は、ブタ気管平滑筋から採取精製したpoly(A)^+RNAによりアフリカツメガエルの卵母細胞上にアセチルコリン活性化非選択的カタイオンチャンネル(Ins-ACh)を再構成できることを確認した。そこで、本年度はまずpoly(A)^+RNAを密度勾配遠心法で分画し、Ins-AChが最大となる分画を得た。この分画からcDNAライブラリーを作製し、E.coliに導入した後、in vitro合成されたmRNAを卵母細胞に注入して観察されるIns-AChの有無を示標にライブラリーのスクリーニングを行った。しかしながら、得られたmRNAではIns-AChが全く確認できない、あるいはスクリーニング中にIns-AChを発現するクローンを見失う等の困難が連続した。その度にcDNAライブラリーを作製し直し、新しいデーター取得解析装置(AXON社DigiPack1200)を導入するなどしてスクリーニングの効率化を図った。Ins-AChを発現するクローンを単離する作業は、実験系を改良しながら現在も継続中である。今後は、得られたcDNAを解析することによりIns-AChの一次構造を決定し、卵母細胞上でキネティクス、Ca^<2+>感受性、チロシンキナーゼ依存性、百日咳毒素感受性について生筋のIns-AChの特性を備えていることを確認してゆく予定である。本研究の成果はCan.J.Physiol.Pharmacol.に発表した。
期刊论文(4)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
楢松雅裕: "P_2プリン受容体を介するラット膀胱平滑筋の収縮に関与する細胞内情報伝達系の解析" 日大医学雑誌. 57(5). 263 (1998)
Masahiro Naramatsu：“P_2嘌呤受体介导的大鼠膀胱平滑肌收缩中涉及的细胞内信号转导系统的分析”日本大学医学杂志57（5）（1998）。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Yamashita,T.: "Nonselective cationic currents activated by activated by acetylcholine in swine tracheal smooth muscle cells"Canadian Journal of Physiology and Pharmacology. 77・10. 796-805 (1999)
Yamashita，T.：“猪气管平滑肌细胞中乙酰胆碱激活的非选择性阳离子电流”加拿大生理学和药理学杂志77·10（1999）。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Elucidation of the molecular mechanism of the mitophagy contributing to the drug resistance and its application to chemotherapy
  • 批准号：
    22K07207
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 资助金额：
    $2.66万
  • 财政年份：
    2022
  • 负责人：
    山下 俊一
  • 依托单位：
    Niigata University
マシニングセンタの熱変形によって生じる加工位置誤差の補正制御
  • 批准号：
    18H00250
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
  • 资助金额：
    $0.34万
  • 财政年份：
    2018
  • 负责人：
    山下 俊一
  • 依托单位：
    Kagoshima National College of Technology
マシニングセンタの熱変形が要因となる加工形状誤差の解析
  • 批准号：
    16H00358
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
  • 资助金额：
    $0.35万
  • 财政年份：
    2016
  • 负责人：
    山下 俊一
  • 依托单位：
    Kagoshima National College of Technology
マシニングセンタの熱変位補正制御に関する研究
  • 批准号：
    26917027
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
  • 资助金额：
    $0.38万
  • 财政年份：
    2014
  • 负责人：
    山下 俊一
  • 依托单位：
    Kagoshima National College of Technology