合成p16^<INK4A>癌抑制微少蛋白粒子による癌治療の基礎的研究

使用合成的p16^<INK4A>抑癌微小蛋白颗粒治疗癌症的基础研究

• 批准号: 10770518
• 负责人: 浦島 充佳
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770518/
• 关键词: p16^<INK4A>; 白血病; P16^<INK4A>; retinoblastoma protein; 癌抑制遺伝子

p16^<INK4A>は癌抑制微蛋白retinoblastoma protein(RB)のリン酸化を抑制することによって細胞増殖を停止させる働きがある。多くの種類の癌細胞においてこのp16^<INK4A>遺伝子に異常が認められた。我々も白血病細胞でp16^<INK4A>遺伝子が欠損しているものを樹立し、p16^<INK4A>遺伝子欠損が白血病化に寄与していることを既に報告している。我々はp16^<INK4A>の機能的に重要な部分を含む微少蛋白粒子を人工的に15種類作製した。これらを我々の樹立したp16^<INK4A>遺伝子欠損白血病細胞の培養液に添加したところ特にaa100-120がflow cytometry上最も強い細胞増殖抑制作用(G1 growth arrest)を有していた。Immunoprecipitation & Western blottingにてretinoblastoma protein のリン酸化が抑制されていることが確認された。平成11年度我々の樹立したp16^<INK4A>遺伝子欠損白血病を放射線照射したSCIDmouseに皮下投与、腹腔内投与、尾静脈投与したところ、それぞれ皮下腫瘤、腹水を伴った骨髄転移、骨髄転移を示し、マウス白血病モデルとして樹立された。同時に尾静脈より合成p16^<INK4A>癌抑制小蛋白粒子を投与したところ、腫瘍の増大速度は有意に抑制された。合成p16^<INK4A>癌抑制小蛋白粒子1回投与では生存率に差は認められなかったが、合成p16^<INK4A>癌抑制小蛋白粒子を3日に1回投与した場合有意に生存率の改善をみた(カプランマイヤー p<0.005)。合成p16^<INK4A>癌抑制小蛋白粒子を皮下投与、腹腔内投与した場合は腫瘍の増大速度に差を認めなかった。尾静脈投与も現在適正な投与量および間隔を検討中である。

p16^<ink4a>通过抑制癌抑制的微孔蛋白视网膜细胞瘤蛋白（RB）的磷酸化来阻止细胞增殖。在多种类型的癌细胞中观察到该p16^<ink4a>基因的异常。我们还建立了一个白血病细胞，具有缺陷的p16^<ink4a>基因，并且已经报道了p16^<ink4a>基因缺乏有助于白血病的发展。我们人为地产生了15种含有p16^<ink4a>功能重要部分的微蛋白颗粒。当将它们添加到我们已建立的P16^<ink4a>基因缺陷的白血病细胞AA100-120时，尤其是细胞生长抑制作用（G1生长停滞）对流式细胞仪的最强。已经证实，因免疫沉淀和蛋白质印迹抑制了视网膜细胞瘤蛋白的磷酸化。当我们在1999年建立的p16^<ink4a>基因缺乏的白血病被皮下，腹膜内和魔术静脉内施用时，我们表现出皮下肿块，骨髓转移和骨骨髓转移的骨骼伴随着腹部的骨骼，并由抗腹部组成。同时，当合成P16^<ink4a>从尾静脉施用癌症抑制的小蛋白质颗粒时，肿瘤生长的速率被显着抑制。尽管一剂合成的p16^<ink4a>癌症抑制的小蛋白质颗粒没有观察到生存率的差异，但是当合成p16^<ink4a>癌症支持的小蛋白质颗粒时，每3天一次给予癌症p16^<ink4a>时，生存率得到了显着提高（kaplan meier p <0.005）。当地下或腹膜内给予合成的P16^<ink4a>癌抑制的小蛋白质颗粒时，肿瘤生长速率没有差异。目前正在考虑尾静脉施用的适当剂量和间隔。