Bリンパ球の癌化とapoptosisに関する研究

点击翻译按钮获取中文摘要

我々は小児白血病患者より細胞株(JKB)を樹立した。当初、bcl-2およびp53遺伝子を導入することにより、その影響を検討する予定であったが、bcl-2蛋白は高いレベルで表出されており、p53もwild typeおよびmutantの混在型でMDM2が強く発現されているため、bcl-2およびp53遺伝子を導入しても無効であることが予想され、実験の方向性を少し変更した。興味深いことに、この細胞株はimmunogulobulin heavy chain locusを含む14q32および癌抑制遺伝子であるp16およびp15 lociを含む9p21の間に染色体転座を示していた。そこでPCRによりp16およびp15 gene exon 2を検査したところhomozygous deletionsが確認され、Western blottingでもp16およびp15蛋白は検出されなかった。p16 and/or p15 gene deletionsが初診時リンパ系悪性腫瘍で高頻度で検出されることから、p16欠損が白血病の病因として非常に大きな役割を果たしている可能性が大きいと考えられる。しかしこの仮説は未だ明らかにはされていない。そこで我々はレトロウイルスにp16遺伝子をクローニングし、JKBにおけるp16蛋白の強制発現を試みた。その結果強い細胞増殖抑制だけではなく、分化誘導傾向も認められた。このことはp16遺伝子が発癌に強く関与していることが示唆される一方で、完全な増殖抑制あるいはアポプトーシスが観察されなかったことを考慮するとその他の因子の関与も示唆された。現在p16とp15遺伝子のJKB細胞へのダブルクローニングを検討している。