リン酸化反応、レドクスによるインターロイキン1レセプターの発現制御

通过磷酸化和氧化还原反应调节 IL-1 受体表达

• 批准号: 10771300
• 负责人: 瀧井 猛将
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10771300/
• 关键词: インターロイキン1; インターロイキン1レセプター; チロシンキナーゼ; 線維芽細胞; レドックス

本研究の目的は、リン酸化反応、レッドクスによるIL-1RI発現調節機構を明らかにし、IL-1の作用調節の可能性を探るものである。そこで、本研究ではチロシンキナーゼの特異的な阻害剤、還元剤、抗酸化剤を用いて検討した。ヒト線維芽細胞株TIG-1にチロシンキナーゼの阻害剤であるゲニステインやチロホスチンで処理すると、^<125>I標識したIL-1の結合をゲニステインは用量依存的、また、経時的にも抑制した。スキャッチャードプロット解析の結果、ゲニステインはIL-1RIの親和性を変えることなく、細胞表面上のレセプター分子を減少させていたことから、恒常的なIL-1RIの発現にはチロシンキナーゼが関与していることが、本研究で初めて明らかとなった。しかし、ゲニステインはIL-1RI mRNAの発現を抑制しなっかったことから、ゲニステインは転写後の調節に働いていることが示唆された。更に、蛋白合成阻害剤であるサイクロへキシミド存在下でもゲニステインの作用が認められたことから、ゲニステインは翻訳過程以後に作用していることが示唆された。次にIL-1RIの減少がIL-1のシグナルの抑制につながるか、ゲニステイン前処理により、細胞表面上のIL-1RI分子を減少させておき、培地交換でゲニステインを取り除いたあと、IL-1刺激によりIL-1RIに会合するセリシスレオニンキナーゼであるIRAKの活性、IL-1誘導インターロイキン6(IL-6)の産生を検討した。何れの活性もゲニステイン前処理によって抑制されていた。これらのことから、IL-1RIの発現を調節することで、IL-1の作用を調節することができることが示された。一方、2-ME、DTT、NAC等の還元剤、抗酸化剤をTIG-1細胞に作用させると、IL-1RI mRNAの発現を抑制した。このことからIL-1RIの発現はmRNAレベルにおいてレッドクスによる制御を受けていることが明らかとなった。

The purpose of this study was to clarify the regulatory mechanism of IL-1RI production and to explore the possibility of IL-1 regulation. In this study, we investigated the use of specific inhibitors, antioxidants and anti-acidifiers. The inhibition of IL-1 in cell line TIG-1 <125>is dose-dependent and time-dependent. The results of the analysis of IL-1RI showed that the affinity of IL-1RI was decreased on the cell surface, and the occurrence of IL-1RI was decreased on the cell surface. The expression of IL-1RI mRNA is inhibited by the expression of IL-1RI mRNA, which is regulated by the expression of IL-1RI mRNA. In addition, the protein synthesis inhibitor has the effect of inhibiting the protein synthesis in the presence of the inhibitor. Secondly, the reduction of IL-1RI is related to the inhibition of IL-1 receptors, the reduction of IL-1RI molecules on the cell surface due to pretreatment with guanosine, the removal of guanosine, the activity of IRAK that is associated with IL-1RI due to IL-1 stimulation, and the production of IL-1-induced interleukin 6(IL-6) are discussed. What is the activity of the enzyme? The expression of IL-1 is regulated by IL-2 and IL-1. Anti-acidification agents such as 1-D, 2-ME, DTT and NAC inhibit the expression of IL-1RI mRNA in TIG-1 cells. The expression of IL-1RI was detected by PCR.

项目成果

H.Kimura,Y.Inukai,T.Takii,Y.Furutani,Y.Shibata,H.,et al.: "Molecular analysis of Constitutive IL-1α gene expression in human melanoma cells: autocrine stimulation through NF-kB activation by endogenous IL-1α" CYTOKINE. 10. 872-879 (1998)

H. Kimura、Y. Inukai、T. Takii、Y. Furutani、Y. Shibata、H. 等人：“人黑色素瘤细胞中组成型 IL-1α 基因表达的分子分析：通过 NF-kB 激活进行自分泌刺激内源性 IL-1α" 细胞因子。10. 872-879 (1998)

T.Takii,M.Hayashi,H.Kimura,H.Hiroma,T.Chiba,,et al.: "A serotonin derivative, N-(p-coumaroyl)serotonin isolated from safflower(carthamus tinctorius L.)oil cake augments the proliferation of normal human and mouse fibroblasts in synergy with basic fibrobla

T.Takii,M.Hayashi,H.Kimura,H.Hiroma,T.Chiba,,et al.：“从红花（carthamustinctorius L.）油饼中分离出的一种血清素衍生物，N-（对香豆酰基）血清素可增强