網膜色素上皮に発現するG蛋白共役受容体遺伝子の網膜変性症例での変異とその機能

视网膜变性时视网膜色素上皮表达的G蛋白偶联受体基因突变及其功能

• 批准号: 12771023
• 负责人: 森村 浩之
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12771023/
• 关键词: 網膜色素上皮; G蛋白共役受容体; ビタミンA; 網膜色素変性症; 分子遺伝; 異性化; 候補遺伝子アプローチ; 網膜; レチナール; 異性化反応

これまでに網膜色素上皮に発現し、ヒトで網膜色素変性症の原因遺伝子と同.定されているRGRというG蛋白共役受容体遺伝子の変異蛋白の機能を解析するために、培養細胞にヒトで報告されているS66R変異遺伝子を導入し、研究を行った。野性型RGRを遺伝子導入した293細胞ではa11-trans retinalを11-cis retinalに500nmの光照射により変換できたが、S66R変異RGRを導入した細胞ではその機能は著しく低下し、11-cis retinalの生成量は5分の1以下であった。また、蛋白の発現量をwestern blotにより解析したところ、野性型RGRに比較してS66R変異RGRの発現は5分の1以下であった。これらの結果よりS66Rの点変異による網膜色素変性症発症の機序は変異蛋白の発現量低下による機能低下と考えられる。日本人の網膜色素変性症患者を対象とした変異検索では、RGR遺伝子には新たな変異を見出すことはできなかった。またRGRと同様にG蛋白共役受容体で網膜色素上皮に発現しているPeropsin遺伝子について検討を行った。まずヒトゲノムライブラリーをスクリーニングし、得られた遺伝子断片の塩基配列を決定することによりこの遺伝子が7つのエクソンよりなることを発見した。この情報をもとに網膜色素変性症患者を対象に変異検索を行った。L2l4Iの置換を網膜色素変性症患者でのみ認めた。正常コントロールではこの置換は認められなかった。家系調査につき現在検討中である。さらにRGRは網膜色素上皮でビタミンAの代謝に関与しているが、この代謝に含まれる酵素のうち近年眼底白点症の原因と同定されたRDH5遺伝子についても眼底白点症患者で変異検索を行った。その結果、日本人においても新規の変異V264G、L310EVを発見した。これらの変異は家系調査により劣性遺伝形式をとっていた。

The development of retinal pigment epithelium and the causes of retinal pigment degeneration are the same. To determine the function of RGR and protein co-receptor and protein variant in cultured cells and report the introduction and study of S66R protein variant. Wild type RGR gene introduced into 293 cells was reduced by 500nm light irradiation, and S66R gene introduced into cells was reduced by 5 minutes or less, and the production of 11-cis retina was reduced by 5 minutes or less. Western blot analysis of protein expression in S66R and wild-type RGRs The mechanism of retinal pigment disorder is the decrease of protein production and function. Japanese patients with retinal pigment disorder have different symptoms. RGR and G protein co-receptor are found in retinal pigment epithelium. This is the first time that a person's identity has been identified. This information is available to patients with retinal pigment disorders. L2l4I replacement in patients with retinal pigment disorder Normal Family investigation is currently underway. RGR is involved in the metabolism of retinal pigment epithelium, including enzymes, and the causes of ocular white spot syndrome in recent years. RDH5 gene is involved in the metabolism of ocular white spot syndrome. As a result, the new regulations of the Japanese were introduced, V264G and L310EV. A family survey was conducted to investigate the genetic diversity of different species.

项目成果

Eri Hirose,Yumiko Inoue,Hiroyuki Morimura et al.: "Mutations in the 11-cis retinol dehydrogenase gene in Japanese patients with fundus albipunctatus"Investigative Ophthalmology & Visual Science. 41. 3933-3935 (2000)

Eri Hirose、Yumiko Inoue、Hiroyuki Morimura 等人：“日本眼底白斑患者的 11-顺式视黄醇脱氢酶基因突变”眼科调查

Hirose, E., Morimura H., et al.: "Mutations in the 11-cis retinol dehydrogenase gene in Japanese patients with fundus albipunctatus"Investigative Ophthalmology and Visual Science. 41(12). 3933-3935 (2000)

Hirose, E., Morimura H., et al.：“日本眼底白斑患者的 11-顺式视黄醇脱氢酶基因突变”调查眼科和视觉科学。