ミオシンリン酸化を介した情報伝達系におけるZIPキナーゼの役割解明に関する研究

ZIP激酶在肌球蛋白磷酸化介导的信号转导系统中的作用研究

• 批准号: 12780538
• 负责人: 堀 麻希
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12780538/
• 关键词: ZIPキナーゼ; ミオシン; 二重リン酸化; アクチン; 培養細胞

野生型及び不活性型ZIPキナーゼの細胞導入用コンストラクトを作成し、それぞれ培養細胞に導入したところ、以下のような知見を得ることができた。1.野生型及び不活性型ZIPキナーゼを導入した細胞を免疫沈澱法により回収し、試験管内でミオシンリン酸化活性を調べたところ、野生型にはミオシンを2重リン酸化(19番目のセリン及び18番目のスレオニンの二か所がリン酸化)する活性が見られたが、不活性型には見られなかった。2.野生型ZIPキナーゼを導入した細胞を2重リン酸化ミオシンを特異的に認識する抗体で蛍光抗体法により観察すると、2重リン酸化ミオシンが著しく増加していることが分かった。しかし、不活性型ZIPキナーゼを導入した細胞では上記のような現象は見られなかった。3.野生型ZIPキナーゼを導入した細胞では、アクチン繊維の再構築が引き起こされていることが分かった。しかし、不活性型ZIPキナーゼを導入した細胞では上記のような現象は見られなかった。これらのことから、ZIPキナーゼは細胞内でミオシンの2重リン酸化を誘導することができること、さらに2重リン酸化ミオシンがアクチン繊維の構築に重要な役割を果たしていることを明らかにした。本研究成果は現在国際誌に投稿中である。

Wild type and び not active type ZIP キ ナ ー ゼ の cells import using コ ン ス ト ラ ク ト を し, consummate そ れ ぞ れ culture cell に import し た と こ ろ, the following の よ う な knowledge を must る こ と が で き た. Type 1. Wild type and び not active ZIP キ ナ ー ゼ を import し た を immune cells precipitates method に よ り back 収 し, test tube で ミ オ シ ン リ ン acidification activity を adjustment べ た と こ ろ, wild type に は ミ オ シ ン を 2 heavy リ ン acidification (19 times eye の セ リ ン and び 18 times の ス レ オ ニ ン の second か が リ ン acidification) す る active が see ら れ た が, no The active type に に can be found at られな った. 2. Wild type ZIP キ ナ ー ゼ を import し た cells を 2 heavy リ ン acidification ミ オ シ ン を specific に know す る antibody で 蛍 light antibody technique に よ り 観 examine す る と, 2 リ ン acidification ミ オ シ ン が the し く raised plus し て い る こ と が points か っ た. The <s:1>, inactive ZIPキナ キナ ゼを ゼを is ゼを introduced into <s:1> た cells で った. The キナ ような phenomenon is recorded above. See られな られな った った. 3. The wild type ZIP キ ナ ー ゼ を import し た cells で は, ア ク チ ン 繊 d build が lead き again の こ さ れ て い る こ と が points か っ た. The <s:1>, inactive ZIPキナ キナ ゼを ゼを is ゼを introduced into <s:1> た cells で った. The キナ ような phenomenon is recorded above. See られな られな った った. こ れ ら の こ と か ら, ZIP キ ナ ー ゼ は intracellular で ミ オ シ ン の 2 heavy リ ン acidification induced す を る こ と が で き る こ と, さ ら に 2 heavy リ ン acidification ミ オ シ ン が ア ク チ ン 繊 d の build に important な "を cut fruit た し て い る こ と を Ming ら か に し た. The research results of this study are currently being submitted to the journal of International に である.

项目成果

Murata-Hori,M.: "Effect of G1 arrest substances on cells in the G1, S and G2 phase of the cell cycle in Tetrahyaena themophila"European.Journal of Protistology. (発表予定). (2000)

Murata-Hori, M.：“G1 阻滞物质对嗜热四鬣狗细胞周期的 G1、S 和 G2 期细胞的影响”，《欧洲原生学杂志》（待出版）。

Gerashchenko.B.I.: "Myosin regulatory light chain as a critical substrate of cell death : a hypothesis"Medical Hypotheses. 54. 850-852 (2000)

Gerashchenko.B.I.：“肌球蛋白调节轻链作为细胞死亡的关键底物：一个假设”医学假设。

Murata-Hori,M.: "A monoclonal antibody raised against an 80-kD subunit of human DNA helicase11"Zoological Science. (発表予定). (2000)

Murata-Hori, M.：“针对人类 DNA 解旋酶 11 的 80-kD 亚基产生的单克隆抗体”《动物学科学》（即将发表）。

Suizu.F.: "Activation of actin-activated MgATPase activity of myosin11 by phosphorylation with MAPK-activated protein kinase-lb (RSK)"Journal of Biochemistry. 128. 435-440 (2000)

Suizu.F.：“通过用 MAPK 激活的蛋白激酶-1b (RSK) 磷酸化来激活肌球蛋白 11 的肌动蛋白激活的 MgATP 酶活性”生物化学杂志。

Hino,M.: "Small heat shock protein(HSP27) associates with tubulin/microtubules in Hela cells"Biochemical and Biophysical Research Communication. 271. 164-169 (2000)

Hino,M.：“小热休克蛋白 (HSP27) 与 Hela 细胞中的微管蛋白/微管相关”生物化学和生物物理研究通讯。