サイトカインが抗HLA抗体による血管内皮細胞傷害に与える影響についての検討

抗ヒト白血球抗原(Human Leukocyte Antigen, HLA)抗体は様々な病態への関与が報告されており、血管内皮細胞への傷害による移植臓器の拒絶反応にも関連していると考えられている。血管内皮細胞上に発現するHLA抗原はin vitroでの長期培養で発現が減少もしくは消失するが、インターフェロンγ(IFN-γ)などのサイトカイン刺激により、その発現が回復、増強することが確認されている。本研究ではサイトカイン作用下の血管内皮細胞におけるHLA抗原発現増強が細胞傷害性に及ぼす影響について心臓、腎臓および肺臓の血管内皮細胞に着目し検討をおこなった。対象臓器として心臓(HMVEC-C)、肺臓(HMVEC-L)および腎臓(GMEC)の内皮細胞を用いた。しかし、HUMVEC-Lは初期培養時の増殖に問題があったためHMVEC-CおよびGMECのみ検討を加えた。HMVEC-CおよびGMECをIFN-γにて刺激することによりHLA-DRが発現されるだけでなくHLA classIの発現も増強することが確認された。IFN-γ濃度はHMVEC-Cで50ng/ml、GMECの場合10ng/mlで発現増強が確認された。一方、HLA発現増強を確認するためには3日以上の刺激が必要であった。この条件を用いてIFN-γ刺激細胞への抗HLA抗体の傷害性について検討を加えた。GMECでは、IFN-γで処理したもののみ抗HLA ClassI抗体で傷害が確認できたのに対し、HMVEC-CはIFN-γ未処理においても傷害が確認された。一方、HLA-DR抗体による傷害はいずれの内皮細胞でもIFN-γ処理未処理に関わらず確認されなかった。このことから、抗HLA ClassI抗体ではIFN-γの存在が移植臓器血管内皮細胞に対する抗体傷害性の影響度に関与する可能性があると考えられた。またHLA-DRは本モデルではIFN-γの影響は認めなかった。しかし、今回の検討では精製抗体1種類のみの確認であり、HLA-DRも含め複数種類使用することや実際の患者血清との反応を確認する必要があること、またin vitroだけでなく動物モデルなどのin vivoでこの現象を確認する必要があり、今後の検討課題であると考えられた。

抗ヒト白血球抗原(Human Leukocyte Antigen, HLA)抗体は様々な病態への関与が報告されており、血管内皮細胞への傷害による移植臓器の拒絶反応にも関連していると考えられている。血管内皮細胞上に発現するHLA抗原はin vitroでの長期培養で発現が減少もしくは消失するが、インターフェロンγ(IFN-γ)などのサイトカイン刺激により、その発現が回復、増強することが確認されている。本研究ではサイトカイン作用下の血管内皮細胞におけるHLA抗原発現増強が細胞傷害性に及ぼす影響について心臓、腎臓および肺臓の血管内皮細胞に着目し検討をおこなった。対象臓器として心臓(HMVEC-C)、肺臓(HMVEC-L)および腎臓(GMEC)の内皮細胞を用いた。しかし、HUMVEC-Lは初期培養時の増殖に問題があったためHMVEC-CおよびGMECのみ検討を加えた。HMVEC-CおよびGMECをIFN-γにて刺激することによりHLA-DRが発現されるだけでなくHLA classIの発現も増強することが確認された。IFN-γ濃度はHMVEC-Cで50ng/ml、GMECの場合10ng/mlで発現増強が確認された。一方、HLA発現増強を確認するためには3日以上の刺激が必要であった。この条件を用いてIFN-γ刺激細胞への抗HLA抗体の傷害性について検討を加えた。GMECでは、IFN-γで処理したもののみ抗HLA ClassI抗体で傷害が確認できたのに対し、HMVEC-CはIFN-γ未処理においても傷害が確認された。一方、HLA-DR抗体による傷害はいずれの内皮細胞でもIFN-γ処理未処理に関わらず確認されなかった。このことから、抗HLA ClassI抗体ではIFN-γの存在が移植臓器血管内皮細胞に対する抗体傷害性の影響度に関与する可能性があると考えられた。またHLA-DRは本モデルではIFN-γの影響は認めなかった。しかし、今回の検討では精製抗体1種類のみの確認であり、HLA-DRも含め複数種類使用することや実際の患者血清との反応を確認する必要があること、またin vitroだけでなく動物モデルなどのin vivoでこの現象を確認する必要があり、今後の検討課題であると考えられた。