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口腔内細菌叢の局在性を利用した法科学資料に付着するヒト唾液の由来推定に関する研究

利用口腔菌群定位推测法医材料上附着的人类唾液来源的研究

基本信息

批准号：
18H00497
负责人：
大田隼
金额：
$ 0.34万
依托单位：
神奈川県警察科学捜査研究所
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
财政年份：
2018
资助国家：
日本
起止时间：
2018 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18H00497/
关键词：
唾液細菌DNA 由来推定

项目摘要

傷害や性犯罪事件等の鑑定実務において、資料に付着する唾液の由来が犯罪事実(咬む、舐める等)を認定する上で争点となる場合がある。しかしながら、現在汎用される唾液の同定法は唾液アミラーゼ活性を指標としているため、その区別は困難である。そこで、本研究では、ヒトの口腔内に普遍的に存在する口腔内細菌叢の局在性に着目し、生息域の異なる複数の細菌を同時に検出・比較することで、物体に付着する唾液の由来を推定する方法の開発を試みた。唾液の由来推定に用いる細菌は、先行研究のあるStreptococcus salivariusおよびVeillonella atypicaをはじめ、Streptococcus oralis、Prevotella maculosa、Staphylococcus epidermidisおよびActinomyces israeliiを加えた計6種で検討を行った。ヒトの舌、歯、口唇から採取した唾液と滴下唾液を対照試料とし、布を用いて模擬試料を作製した。また、模擬試料を室温で約1ケ月間保存して陳旧試料とした。各試料から細菌DNAを抽出し、リアルタイムPCRにより総細菌DNAを定量して鋳型DNA量を標準化した後、6種の標的細菌DNAおよび総細菌DNAをPCR増幅した。続いて、PCR増幅産物を電気泳動し、各PCR増幅産物に由来するバンドの蛍光強度を定量化し、多変量解析した。各試料について、6種の細菌DNAの存在比を主座標分析した結果、歯と口唇に由来する唾液の対照試料および模擬試料は、それぞれ類似した特徴を示したが、舌と滴下に由来する唾液の対照試料および模擬試料はともに同様の特徴を示した。また、陳旧試料の解析の結果、上記の特徴は変化し、いずれの対照試料においても陳旧試料との間に類似性は認められなかった。本研究により、歯および口唇の接触に由来して付着した唾液については、他と識別できる可能性が示唆された。今後は、唾液が付着する物体の種類が解析に及ぼす影響等を検討し、実務適用可能な唾液の由来推定法の開発を試みる。一方、今回の検討では舌および滴下に由来する唾液については識別が困難であったため、標的とする細菌の種類を変更する等の検討を進める予定である。

The identification of crimes, such as sex crimes, the payment of saliva, the origin of crimes (bites, licks, etc.), the identification of sexual crimes, the identification of crimes, the identification of sexual crimes, the identification of crimes, the payment of saliva, etc., the causes of crimes (bites, licks, etc.). At present, the same method is used to determine the activity of saliva, which means that there is no difference between the two groups. In this study, it is common in the oral cavity for the presence of bacteria in the oral cavity. The bacteria in the oral cavity are in sexual contact, the biological domain is detected in the complex bacteria, and the object is exposed to saliva. The reason for the presumption method to start the test. Saliva was presumed to be infected by bacteria, Streptococcus salivarius, Prevotella maculosa, Streptococcus oralis, Prevotella maculosa, Staphylococcus epidermidis, Actinomyces israelii, and so on. The tongue, lips, mouth and lips should be dripped with saliva, and the cloth should be made with the material of the mold. The old materials will be stored at room temperature for about 1 month. After the amount of DNA extracted from each kind of bacteria was extracted and tested, the quantity of DNA quantitative DNA was standardized, and the amplitude of DNA PCR of 6 strains of bacteria was measured. Measurement, PCR, electrophoretic activity, origin of each PCR, quantitative analysis of light intensity, multi-volume analysis. There are six kinds of bacteria DNA in each sample, the results of the main seat analysis, the origin of the mouth and lip, the saliva and the mouth, the saliva, the mouth, the mouth, the The results of the analysis of the old material, the results of the analysis of the old material. In this study, the cause of mouth and lip contact was related to saliva contact, and the possibility of saliva contact was suggested. In the future, saliva will be responsible for the analysis of objects and other information, and may be used to determine the origin of saliva. On the one hand, the reason for the drop of your tongue this time is that saliva, saliva, and so on, do not know what to do.