ABO亜型および異型骨髄移植後患者等でのABO遺伝子型検査の有用性の検証

ABO 基因型检测对 ABO 亚型患者和非典型骨髓移植后患者的有效性的验证

• 批准号: 24931022
• 负责人: 曽根 伸治
• 金额: $ 0.26万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24931022/
• 关键词: ABO血液型; 遺伝子型タイピング; Luminex法

簡便に多数検体の測定が可能なLuminex法(蛍光マイクロビーズアレイシステム)のABO血液型遺伝子のタイピング試薬((株)医学生物学研究所)を用いて、血清学的検査で判定困難な症例を中心に有用性を検討した。血清学的検査で判定できた成人118検体、乳児13検体と、判定困難であった乳児28検体、亜型が疑われた21検体、また大量輸血後の3検体と、異型骨髄移植後の患者の12検体を対象とした。白血球よりDNAを抽出しABO遺伝子のexon6およびexon7領域に特異的なプライマーを用いMultiplex-PCRで増幅した。増幅産物を点変異特異的な配列をもつ数十種類のプローブを固相化したポリスチレンマイクロビーズとハイブリダイゼーションさせ、結合の有無をレーザー光によって測定した。専用の判定ソフトウェアで、検出された蛍光値データとカットオフ値と比較、各遺伝子の発現の陽性・陰性を判定し、ABO遺伝子型を決定した。血清学的検査で判定できた成人および乳児の検体は、遺伝子検査で2つの対立遺伝子型を決定できた。判定困難な乳児28検体は、遺伝子検査によってABO型の判定が可能となった。亜型が疑われた16検体は、抗原の発現に影響する塩基置換がある型3件、血清学的検査ではA,B抗原を検出できないAm,Bm型5件、一般的なA,B型8件であることが判明した。また、大量輸血後の検体でも本人の遺伝子型の決定は可能であった。A型患者にB型ドナー末梢血幹細胞移植後の12検体で血液型変化を調べた。生着時期までは遺伝子型を判定できなかったが、血清学的検査に比べると、10日ほど早く移植後のABO型を判定できた。血清学的な精査では検体量が多く必要であったが、遺伝子検査は少量検体でも十分量のDNAが抽出できれば遺伝子増幅が可能であり、A、B抗原減弱例や亜型の確認法として有用である。また、血液製剤は白血球除去が施され、白血球から遺伝子を抽出する遺伝子検査では輸血による混入白血球の影響が少なく、大量輸血後も本人の血液型を確定すできると考えられた。ABO血液型の遺伝子検査は、その特徴と限界を理解し血清学的検査と適宜併用することで、安全な輸血療法に貢献できると考えられる。

Simple detection of most types of ABO blood type gene by Luminex method (Laboratory of Medical Biology, Inc.); serological examination; difficult diagnosis; central usefulness; Serological examination was performed in 118 cases of adults, 13 cases of breast cancer, 28 cases of breast cancer, 21 cases of breast cancer, 3 cases of patients after massive blood transfusion, and 12 cases of patients after allogeneic bone transplantation. White blood cell DNA extraction exon6 and exon7 domain specific DNA extraction using Multiplex-PCR amplification Amplitude of the product is different from that of the product. It is composed of dozens of kinds of solid phase, solid phase and light phase. The determination of the presence of each gene is positive and negative, and the ABO gene type is determined. Serological examination determines whether an adult or a child has a genetic profile, and genetic examination determines whether an individual has a genetic profile. The determination of ABO type is possible due to the difficulty in determining the type of breast 28. 16 samples were identified by serological examination, 3 samples were identified by gene substitution, 5 samples were identified by serological examination, 8 samples were identified by general A and B antigens. After a large transfusion, the patient's genetic type is determined. 12-part blood typing after peripheral blood stem cell transplantation in patients with type A and type B The identification of ABO genotype after transplantation was performed on the 10th day after transplantation. Serological examination is necessary for more than one sample, genetic examination is useful for less than one sample, DNA is extracted from more than one sample, DNA is amplified, A and B antigens are attenuated, and confirmation methods are useful. Blood system: leukocyte depletion, leukocyte DNA extraction, DNA testing, transfusion, effects of mixed leukocytes, determination of blood type after massive transfusion ABO blood type genetic testing, characteristics and limits of understanding, serological testing, suitability for use, and contribution to safe transfusion therapy

项目成果

ABO血液型遺伝子検査の有用性

ABO血型基因检测的用处

• 发表时间: 2012
• 作者: 三島由祐子;曽根伸治
• 通讯作者: 曽根伸治