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造血細胞型プロスタグランジンD合成酵素遺伝子の単離と炎症における機能の解析

造血细胞型前列腺素D合酶基因的分离及其在炎症中的功能分析

基本信息

批准号：
08770111
负责人：
金岡禧秀
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Osaka Bioscience Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

造血細胞型PGD合成酵素は末梢組織におけるプロスタグランジン(PG)D_2の生合成を司っており、脾臓の組織球、胸線の樹状細胞、皮膚のランゲルハンス細胞などの抗原提示細胞及び肥満細胞に局在することが知られている。研究代表者は造血細胞型PGD合成酵素と炎症・アレルギーの関係を分子レベルで明らかにすることを目的としてラットの本酵素cDNAの単離を行った。さらに平成8年度において以下のことを明らかにした。1)ラットPGD合成酵素cDNAをプローブとしてマウス染色体遺伝子ライブラリーをスクリーニングし、造血細胞型PGD合成酵素遺伝子を含むDNA断片を単離しDNA配列を決定した。その結果、マウス造血細胞型PGDの合成酵素遺伝子は6エクソン、5イントロンから構成されており、全長は約28kbに及ぶことがわかった。エクソン1の上流にはTATA box配列、GC box配列はみられず、マウス染色体全般に存在するL1 repeat配列のR-elementが存在し、転写制御に関与する可能性が示唆された。2)1)と同様にヒト肝臓染色体遺伝子ライブラリー、ヒト造血細胞型PGD合成酵素遺伝子第2エクソンを含むDNA断片を単離し、このDNA配列よりヒト造血細胞型PGD合成酵素cDNAを5′-RACE法により、クローニングした。ヒト造血細胞型PGD合成酵素はラット、マウスの酵素と約83%の相同性(アミノ酸)を有していた。ヒト臓器のmRNA分布を調べると、胎盤に最も多く発現しており、次いで肺、骨髄、胎児肝であり脳にも発現が認められた。3)本酵素のマウス染色体遺伝子より第2〜4エクソンをneo遺伝子で置換したターゲティングベクターを構築しES細胞への導入を開始した。

Hemopoietic PGD synthesis enzyme (PG) DL2 was used to synthesize hemopoietic stem cell, spleen cell, chest line cell, skin cell, fat cell and fat cell. The representative of the study is hematopoietic cell-type PGD synthesis enzyme, inflammation, inflammation, In the year of Pingcheng, the following is a clear picture of the year. 1) the PGD synthesis enzyme cDNA, hemopoietic PGD synthesis enzyme, and hematopoietic cell-type DNA synthesis enzyme contains DNA fragments, isolation, DNA alignment and determination. The results showed that the haematopoietic cell-type PGD synthesis enzymes were 6, 5 and 5, respectively. The whole length of the enzyme was about 28kb, and the whole length was not. TATA box alignment, GC box alignment, chromosome complete existence, L1 repeat alignment, R-element existence, writing control, and possibility. 2) 1) in the same way, the liver chromosomes were divided into two groups: PGD synthesis enzyme, hematopoietic cell-type PGD synthesis enzyme. About 83% of the hemopoietic cell-type PGD synthesis enzymes are homologous (homologous acid). The mRNA distributes the most common symptoms of the fetus, the lungs, bones, and the liver of the fetus. 3) this enzyme is responsible for the growth of chromosomal neo cells in the second to fourth weeks. This enzyme is responsible for the growth of ES cells.