細菌感染,細菌内毒素によるマクロファージ活性化に関与するシグナル伝達分子の解析

细菌感染和细菌内毒素参与巨噬细胞活化的信号转导分子分析

• 批准号: 08770197
• 负责人: 斎藤 慎二
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770197/
• 关键词: LSP; マクロファージ; CD14; MAPキナーゼ

LPS応答の細胞内シグナル伝達経路を明らかにすることを目的にマクロファージ細胞株J774.1細胞(CD14^+)およびそのCD14発現欠損変異株であるJ7.DEF.3細胞(CD14^-)を用い、CD14依存性、非依存性でのマクロファージのLPS応答性の差異を検討してきた。これまでに、LPS刺激マクロファージからのNO産生およびIFN-β産生にはCD14依存性が認められること、また、CD14依存性NO産生にはIFN-βの産生が必須であることを明らかにしてきたが、本年度は、マクロファージ細胞内シグナル伝達がCD14陽性、陰性細胞間でどの様に異なるのかについて検討した。CD14^+細胞およびCD14^-細胞をLPSにて刺激し、細胞内でチロシンリン酸化の亢進を受けるタンパク質を抗リン酸化チロシン抗体(PY-20)、また活性化MAPキナーゼを抗リン酸化MAPキナーゼ抗体を用いたイムノブロットによりそれぞれ検出した。CD14^+細胞ではLPS刺激後40kDa近辺の数種のタンパク質に顕著なチロシンリン酸化の亢進が認められた。一方、CD14^-細胞では、LPS刺激によるTNFの産生は十分認められるのにも関わらず、LPS刺激によるこれらのタンパク質のチロシンリン酸化の亢進は、CD14^+細胞に比べ、著しく弱かった。これらのチロシンリン酸化タンパク質は、抗MAPキナーゼ抗体、抗リン酸化MAPキナーゼ抗体を用いたイムノブロットによりMAPキナーゼ(Erk 1,Erk 2)と同定された。さらにMAPキナーゼファミリーであるp38のリン酸化についてもErk 1,2と全く同様の挙動を示した。これらの結果から、CD14非依存性のLPSシグナル伝達経路では、MAPキナーゼ系の活性化を介さないTNF産生の誘導が可能であることが示唆された。現在、両細胞間でのNF-κB活性化の差異を検討しているが顕著な差は認められず、CD14非依存性のLPSシグナル伝達経路でも十分にNF-κB活性化を引き起こせるものと考えられる。

LPS said that the cell line J774.1 cell line (CD14 ^ +) cell line J774.1 (CD14 ^ +) was not available for use, CD14-dependent and non-dependent cell line (CD14 ^ -). The cell line J774.1 cell line (CD14 ^ +) was not available because of its poor responsiveness, CD14 dependence and non-dependence. It is necessary to recognize the dependence of IFN- β on CD14 dependence on CD14. It is necessary to verify that IFN- β is dependent on NO. It is necessary to recognize that IFN- β is dependent on IFN-. This year, it is necessary to recognize that IFN- β is dependent on IFN- β. This year, it is necessary to make clear that the levels of CD14 in the cells of this year are good. CD14 ^ + Cellular LPS (CD14 ^) stimulation, intracellular LPS (acidification) hyperactivity (PY-20), activation of MAP antibody (PY-20), activation of CD14 antibody (anti-acidification antibody), anti-acidification antibody (anti-acidification antibody), anti-acidification antibody (anti-acidification antibody). After the stimulation of LPS, several kinds of 40kDa were stimulated by CD14 ^ + cells, and the acidification activity of CD14 cells increased significantly. On the other hand, LPS stimulation, LPS stimulation, TNF stimulation, LPS stimulation, CD14, CD14, CD14, The anti-MAP antibody, the anti-acid antibody, the anti-acidified antibody, the anti-acidified antibody and the anti-Erk antibody. This is the first time that p38 has been acidified. This is not true. Erk 1, Erk 1, and 2 have been shown in the same campaign. The results show that CD14 is independent of the LPS response and that the MAP response is active. The TNF health care provider may show signs of instigation. At present, intercellular NF- κ B activation is sensitive to NF- κ B activation, and NF- kappa B activation leads to poor health care.

项目成果

Saito,S.and Nakano,M.: "Nitric oxide production by peritoneal macrophages of Mycobacterium bovis BCG-infected or non-infected mice." Journal of Leukocyte Biology. 59. 908-915 (1996)

Saito,S. 和 Nakano,M.：“牛分枝杆菌 BCG 感染或未感染小鼠的腹膜巨噬细胞产生一氧化氮。”